药物分析

第一章色谱法导论１
一、概述１
二、基本术语１
(一)保留时间和调整保留时间１
(二)保留因子２
(三)分离因子和相对保留２
(四)谱带展宽和柱效２
(五)谱带展宽的ｖａｎ　ｄｅｅｍｔｅｒ方程３
(六)谱带展宽的柱外效应５
(七)分离度６
(八)峰不对称性７
三、色谱定量分析７
(一)校正因子８
(二)校正因子的测定方法８
参考文献８
第二章气相色谱法１０
第一节概述１０
一、气相色谱法的特点１０
二、分离度和保留指数１１
第二节色谱柱１３
.一、填充柱１３
(一)固定液１３
(二)担体１９
(三)色谱柱的制备２１
(四)多孔聚合物微球２２
二、空心柱２３
(一)柱管２３
(二)柱类型２４
(三)固定相与稳定性２４
(四)色谱柱的选择２５
第三节进样系统２６
一、填充柱进样口２６
二、毛细管柱进样口２７
(一)分流进样２７
(二)不分流进样２９
(三)柱头进样３３
三、顶空进样３４
(一)基本原理３４
(二)手动进样 ｈｓ玻纾悖常
(三)自动进样(压力平衡系统)３７
第四节检测器３８
一、火焰离子化检测器３８
(一)工作原理３８
(二)影响fid灵敏度的因素３９
二、电子捕获检测器４０
三、检测器与fsot柱的连接４０
第五节样品的预处理及衍生物制备４１
一、样品的预处理４１
二、衍生物制备４１
(一)三甲基硅烷化试剂４２
(二)甲酯化试剂４２
(三)卤素试剂４２
第六节应用实例４３
一、有机溶剂残留量测定４３
(一)盐酸莫索尼定中有机溶剂残留量的测定４３
(二)顶空气相色谱法对盐酸曲马多中二氧六环残留量的限量检测４５
(三)微量顶空gc技术用于测定水不溶药物中的有机溶剂残留４６
二、挥发油等成分分析４８
(一)高良姜及其近缘植物挥发油成分的气相色谱指纹图谱研究４８
(二)气相色谱法测定紫苏叶中紫苏醛的含量５１
(三)紫苏子中α惭锹樗岬钠相色谱法测定５３
(四)穿龙薯蓣总皂苷中薯蓣皂苷元含量的毛细管色谱法研究５４
(五)川芎干燥根茎挥发油化学成分及其稳定性的研究５５
(六)挥发油固相萃取预分离５８
三、gc在生物样品中的应用５９
(一)气相色谱电子捕获法测定人体血浆中尼索地平的浓度５９
(二)人尿中克罗帕米的gc／msd检测方法研究６１
(三)气仓柿用法测定血浆中阿司匹林和水杨酸浓度及人体药代动力学研究６３
(四)气相色谱／电子捕获法测定人血浆中的关附甲素６６
(五)气相色谱／电子捕获法测定人血浆中的ｐａｒｏｘｅｔｉｎｅ６７
(六)电子捕获及火焰离子化气相色谱法测定尿中扁桃酸对映体６８
(七)液相微萃取／毛细管气相色谱法测定生物介质中的苯二氮类药物７２
四、gc用于氨基酸分析(冬瓜果肉中游离氨基酸的gc／ms分析)７７
参考文献８０
第三章平面色谱法８１
第一节概述８１
一、薄层色谱法的特点８１
二、平面色谱法的主要技术参数８２
(一)保留值８２
(二)分配系数与容量因子８３
(三)理论塔板数与塔板高度８４
(四)分离度及分离数８４
第二节滤纸及吸附剂８５
一、滤纸及吸附剂的选择８５
(一)滤纸８５
(二)吸附剂８６
二、薄层的制备９１
(一)载板(支持物)９１
(二)黏合剂及添加剂９１
(三)涂层方法９２
(四)薄层板的活化与活度标定９３
(五)滤纸及薄层板的预处理９３
(六)吸附剂及预制板包装上的符号及含意９４
第三节点样９４
一、点样方式和设备９４
(一)点状点样９４
(二)带状点样９５
(三)自动点样９５
(四)其他点样方式９５
二、样品溶液及点样顺序９５
第四节展开９６
一、展开方式９６
(一)一维展开——单向展开９７
(二)二维展开——双向展开９８
(三)强迫流动展开９８
二、展开设备９８
(一)上行展开室９９
(二)下行展开室９９
(三)水平展开室９９
(四)全自动展开室１００
(五)加压展开室１０２
(六)旋转薄层色谱仪１０３
三、展开剂１０３
(一)吸附薄层色谱法１０４
(二)聚酰胺薄层色谱法１０８
(三)分配薄层和纸色谱法１０８
(四)离子交换薄层色谱法１０９
(五)凝胶薄层色谱法１０９
(六)胶束薄层色谱法１１０
(七)包合薄层色谱法１１１
(八)手性薄层色谱１１１
四、影响展开的因素１１１
(一)相对湿度的影响１１１
(二)溶剂蒸气的影响１１２
(三)温度的影响１１５
(四)展开方式的影响１１５
(五)展距的影响１１５
(六)展开室的放置１１６
第五节定位与定性１１６
一、定位１１６
(一)光学检出法１１６
(二)蒸气显色法１１６
(三)物理显色法１１６
(四)试剂显色法１１６
(五)生物自显影１１９
(六)放射自显影１１９
二、定性１１９
(一)斑点的ｒｆ值１１９
(二)斑点的显色特性１１９
(三)斑点的光谱扫描１２０
(四)薄层色谱与其他分析技术的联用１２０
第六节含量测定１２１
一、半定量１２１
(一)目测比较法１２１
(二)限量检查法１２２
二、定量１２２
(一)间接定量(洗脱测定法)１２２
(二)直接定量(薄层扫描法)１２２
三、影响薄层扫描定量的因素１３２
(一)吸附剂性能及薄层质量１３２
(二)点样１３３
(三)展开１３３
(四)显色１３３
(五)薄层扫描定量１３４
第七节平面色谱法在药物分析中的应用１３４
一、中草药和中成药的鉴别及成分分析１３４
(一)中药材的品种鉴别１３５
(二)中成药的鉴别１３９
(三)中药的薄层指纹图谱(图像)鉴别１４８
(四)中草药成分分析１５５
(五)中成药的含量测定及质量标准研究１６５
二、平面色谱在合成药物分析中的应用１７3
(一)药物的定性鉴别１７４
(二)纯度检查１８０
(三)合成药制剂的含量测定１８３
(四)稳定性考察１９０
(五)体内药物的测定及药物代谢研究１９５
参考文献２０４
第四章高效液相色谱法２０７
第一节分离度和实验条件２０７
一、溶剂强度的影响２０８
二、选择性的影响２０９
(一)改变流动相２０９
(二)改变固定相２１１
(三)改变温度２１１
三、柱理论板数的影响２１１
(一)柱条件和分离２１２
(二)柱理论板数和流动相流速２１２
(三)柱外效应２１２
四、进样量的影响２１３
(一)体积过载，进样体积对分离的影响２１３
(二)质量过载，样品质量对分离的影响２１３
(三)痕量分析２１４
第二节色谱柱２１４
一、柱填料２１４
(一)硅胶填料２１５
(二)多孔聚合物２１６
(三)其他无机填料２１６
二、键合固定相２１７
(一)键合硅胶２１７
(二)极性取代基硅烷键合相２１７
(三)反相键合相的保留２１８
(四)键合相柱的稳定性２１８
(五)键合相填料的新进展２２０
第三节色谱峰的检测２２２
一、uv检测器２２２
二、其他检测器２２６
(一)折光检测器和蒸发光散射检测器２２６
(二)荧光检测器２２７
(三)电化学检测器２２７
(四)质谱检测器２２７
第四节建立分析方法的步骤和样品制备２２８
一、建立分析方法的步骤２２８
二、样品制备２２９
(一)溶剂萃取２２９
(二)固相萃取２２９
(三)其他方法２３０
三、hplc方法的选择与建立２３０
第五节反相色谱法２３１
一、中性化合物反相色谱法２３１
(一)溶剂强度２３３
(二)溶剂的选择性２３４
二、酸、碱性及离子化合物反相色谱法２３５
(一)酸碱平衡与保留２３５
(二)化合物的ｐｋａ２３６
(三)缓冲溶液的选择２３６
(四)酸碱性样品rpc的优化２３７
三、离子对色谱法２４０
(一)保留机制２４０
(二)流动相ｐｈ值２４０
(三)离子对试剂浓度２４０
(四)离子对试剂类型２４１
(五)起始条件２４１
(六)保留范围及选择性的控制２４２
第六节正相色谱法２４５
一、npc的保留２４６
(一)样品和溶剂的定位２４６
(二)溶剂强度２４６
(三)流动相选择性２４８
(四)柱类型的影响２４８
(五)温度影响２４８
(六)用水溶液流动相分离亲水样品２４８
二、npc的优化２４９
(一)起始实验２４９
(二)调整保留范围２４９
(三)优化选择性２５０
(四)其他问题２５０
第七节其他分离模式２５０
一、离子交换色谱法２５０
(一)保留的基础２５０
(二)方法的建立２５１
(三)硅胶柱２５２
二、分子排阻色谱法２５２
(一)sec保留的基础２５３
(二)方法的建立２５４
三、手性hplc２５５
(一)手性衍生化２５６
(二)手性流动相添加剂２５６
(三)手性固定相２５６
(四)手性识别原理２５６
(五)以蛋白为基础的ｈｐｌｃ手性固定相２５８
(六)其他手性固定相２６０
第八节梯度洗脱２６７
一、概述２６７
二、梯度洗脱原理２６８
(一)梯度陡度的影响２６９
(二)梯度范围的影响２７０
(三)梯度形状的影响２７２
三、梯度分离方法的建立２７３
四、梯度分离的实验条件２７５
(一)设备差异２７５
(二)分离的重现性２７６
(三)基线问题２７７
第九节应用实例２７７
一、药品的含量测定及有关物质、降解产物检查２７７
(一)rp瞙plc法测定盐酸吡格列酮含量及有关物质的方法学研究２７７
(二)rp瞙plc法测定贝诺酯及其有关物质２８０
(三)高效液相色谱法测定雷登泰口服液中愈创木酚甘油醚、盐酸伪麻黄碱、
氢溴酸右美沙芬的含量２８３
(四)高效液相色谱法测定土霉素及其盐酸盐的含量和有关物质２８５
(五)头孢曲松钠含量测定与有关物质检查２８７
(六)高效液相色谱法检查ｎ(反式4惨毂环己基甲酰基)玻洫脖奖氨酸中
的顺式异构体杂质２８９
(七)安美汀中高分子杂质的分离分析与质量控制２９１
(八)柱前衍生化hplc法同时测定注射用头孢拉定中的3种成分２９４
(九)发酵液中红霉素及有关物质的测定２９５
(十)梯度正相色谱法用于高通量药物筛选２９７
二、手性药物分离２９８
(一)柱前衍生化rpc分离布洛芬等羧酸类药物对映体２９８
(二)β不泛精手性流动相添加剂rpc分离氯噻酮(ｃｈｌｏｒｔｈａｌｉｄｏｎｅ)对映体３００
(三)蛋白手性hplc柱的保留特性３０２
(四)西沙比利手性hplc药物动力学研究３０５
三、氨基酸、多肽、蛋白质和多糖的分析３０８
(一)ａｃｃｑ玻簦幔绶ú舛ǜ捶桨被酸注射液中氨基酸的含量３０８
(二)重组人胰岛素类似物的hplc分析３１０
(三)重组人生长激素胰蛋白酶肽图谱的微径lc／ms研究３１４
(四)首批重组人组织纤溶酶原激活剂国家标准品的研制３１９
(五)高效液相色谱法测定尿多酸肽注射液中小分子肽的分子量３２１
(六)高效凝胶渗透色谱法在右旋糖酐铁质控中的应用３２２
(七)高效凝胶渗透色谱法测定莫海林分子量及其分布３２５
四、体液中药物浓度测定及药物代谢动力学研究３２７
(一)人血浆和尿中替莫唑胺(ｔｅｍｏｚｏｌｏｍｉｄｅ)的测定３２７
(二)体液中果聚糖的快速测定３２９
(三)克林沙星在大鼠体内的药代动力学和生物利用度３３１
(四)手性和非手性联用色谱法研究尼卡地平对映异构体兔体内过程的差异性３３３
五、中药成分和中药指纹图谱测定３３７
(一)伊犁贝母中西贝素和西贝素苷的高效液相色谱舱舴⒐馍⑸浼觳夥ǎ常常
(二)反相高效液相色谱法测定长春花组织培养物中吲哚生物碱含量３３９
(三)穿龙薯蓣中薯蓣皂苷元的高效液相色谱法测定３４２
(四)三七注射液指纹图谱的lc／ms测定３４３
(五)西青果与诃子的hplc指纹图谱鉴别研究３４６
参考文献３５０
第五章电泳法和毛细管电泳法３５３
第一节电泳法３５３
一、基本原理３５４
二、影响颗粒泳动速度的因素３５５
(一)测试样品３５５
(二)电场强度３５５
(三)缓冲液３５５
(四)溶液的温度和黏度３５６
(五)电内渗３５６
(六)分子筛效应３５６
三、纸电泳３５６
(一)仪器装置３５７
(二)操作法３５７
(三)应用实例３５８
四、乙酸纤维薄膜电泳３６０
(一)仪器装置３６１
(二)操作法３６１
(三)应用实例——人血白蛋白(或丙种球蛋白)纯度检查３６２
五、琼脂糖凝胶电泳３６３
(一)仪器装置３６４
(二)操作法３６４
(三)应用实例３６５
六、聚丙烯酰胺凝胶电泳３６９
(一)聚丙烯酰胺凝胶电泳的分类３６９
(二)不连续电泳的浓缩效应３６９
(三)聚丙烯酰胺凝胶的聚合３７１
(四)仪器装置３７４
(五)操作法３７５
(六)相对迁移率及纯度测定３８０
(七)应用实例３８１
七、sds簿郾烯酰胺凝胶电泳３８２
(一)原理３８２
(二)缓冲系统的选择３８３
(三)凝胶浓度的选择３８４
(四)样品的制备３８４
(五)标准蛋白的选择３８５
(六)制胶、加样、电泳、染色和脱色３８５
(七)分子量测定３８５
(八)注意事项３８５
(九)应用实例３８６
第二节毛细管电泳法３８８
一、基本原理３８８
(一)电渗流３８９
(二)淌度与迁移时间３９０
(三)分离效能与分离度３９１
二、毛细管电泳的分离模式３９４
(一)毛细管区带电泳３９４
(二)胶束电动毛细管色谱４０２
(三)毛细管凝胶电泳４０６
(四)毛细管等电聚焦电泳４０８
(五)毛细管等速电泳４１０
(六)其他分离模式４１１
三、毛细管电泳仪的基本组成部件４１３
(一)毛细管柱４１３
(二)直流高压电源４１４
(三)毛细管恒温装置４１４
(四)电极和溶液控制系统４１４
(五)检测器４１６
四、毛细管电泳的实验操作４２０
五、应用实例４２５
(一)多肽和蛋白质类药物４２５
(二)中药及中药复方制剂４２９
(三)化学药物及其复方制剂４３２
(四)抗生素类药物４３９
参考文献４４０
第六章分光光度法４４３
第一节概述４４３
一、分光光度法原理４４３
二、光吸收的定律４４４
第二节紫外部杉光分光光度法４４５
一、有机化合物的uv玻觯椋蠊馄祝矗矗
(一)电子跃迁类型４４５
(二)发色团与助色团４４５
(三)吸收带类型４４６
二、有机化合物的发色团４４６
(一)单个发色团及其相互作用４４６
(二)烯和多烯４４７
(三)苯和芳烃４４８
(四)羰基化合物４５０
三、应用实例４５１
(一)药品的鉴别４５２
(二)药品的杂质检查４５３
(三)药品的含量测定４５４
第三节红外分光光度法４６１
一、概述４６１
二、基本原理４６１
三、实验技术４６３
(一)固体和液体样品４６３
(二)气体样品４６５
(三)气相色谱埠焱夤馄琢用技术４６５
(四)固体样品的漫反射ｉr光谱４６８
四、振动类型和红外光谱４６８
五、特征吸收４７０
(一)与氢连接的单键的吸收带４７４
(二)叁键和累积双键的吸收带４７７
(三)双键ｃo、ｃｎ、ｃｃ、ｎｎ、ｎo的吸收带４７８
(四)芳香化合物典型吸收带４８２
(五)指纹区吸收带４８３
六、定量分析４８４
(一)ir定量分析的测定条件４８４
(二)吸收度a的测定４８５
(三)ir定量方法４８５
(四)吸收度比法４８６
(五)内标法４８６
七、应用实例４８７
(一)结构确证４８７
(二)多晶的ir光谱４８９
(三)含量测定４９０
参考文献４９１
第七章核磁共振光谱４９２
第一节核磁共振基本原理４９２
一、核自旋４９２
二、核磁共振４９３
(一)核的磁化——在外磁场ｈ０中核的进动与取向４９３
(二)核磁共振现象４９４
三、弛豫４９５
(一)原子核磁能级上的粒子分布４９５
(二)弛豫过程４９５
四、化学位移４９６
(一)核外电子的抗磁屏蔽(σ抗）４９７
(二)核外电子的顺磁屏蔽（σ顺）４９７
(三)远程屏蔽（σ远）４９８
(四)化学位移及其表示方法４９８
五、自旋沧孕偶合４９９
六、核磁共振信号强度４９９
第二节实验技术５００
一、脉冲傅里叶变换核磁共振仪５００
二、射频脉冲５０２
三、自由感应衰减信号５０３
四、傅里叶变换及其在nmr谱中的应用５０４
五、样品及溶剂５０５
第三节质子核磁共振谱５０６
一、化学位移５０６
(一)影响化学位移的因素５０６
(二)化学位移与分子结构５１４
二、自旋沧孕偶合(偶合常数)５２５
(一)邻碳偶合５２５
(二)同碳偶合５２９
(三)远程偶合５３１
(四)芳烃及杂环质子间的偶合５３１
(五)质子与其他磁核的偶合５３３
三、氢谱的解析５３3
(一)自旋偶合系统的命名方式５３５
(二)一级分析５３９
(三)氢谱解析应注意的问题５４２
(四)氢谱解析的一般步骤５４８
(五)氢谱解析实例５４９
第四节核磁共振碳谱５５3
一、化学位移５５３
(一)影响１３ｃ化学位移(δc)的因素５５３
(二)各类有机物中１３ｃ的化学位移５５６
二、偶合常数５９３
三、双共振技术５９８
(一)质子宽带去偶５９８
(二)偏共振去偶５９９
(三)选择性质子去偶６００
(四)门控去偶６０１
(五)反转门去偶法６０１
四、多脉冲实验６０２
(一)不灵敏核的极化转移增益法６０４
(二)无畸变极化转移增益法６０７
第五节二维核磁共振光谱６１０
一、二维核磁共振的基础知识６１０
(一)２ｄ玻睿恚虻幕本概念６１０
(二)２ｄ瞡mr谱的优点６１０
(三)２ｄ玻睿恚蚴笛榈氖奔浞侄危叮保
(四)２ｄ玻睿恚虻男藕偶锹挤绞剑叮保
(五)２ｄ玻睿恚蚬舱穹宓拿名６１１
二、二维核磁共振的基本类型６１１
(一)无混合期的２ｄ谱——２ｄ分解谱６１１
(二)有混合期(m段)的二维谱——2d相关谱６１１
三、其他实用2d瞡mr谱６１８
(一)全相关谱６１８
(二)异核多量子相关６１９
(三)异核多键(远程)相关６19
第六节应用实例６２2
一、未知物的结构确证６２2
(一)充分了解样品的基本性质和相关数据６２2
(二)由分子式求不饱和度ω６２2
(三)ｎｍｒ谱的解析６２2
(四)解析实例６２3
二、已知结构化合物的c、h信号归属６３0
(一)解析的一般步骤６３1
(二)实例６３1
参考文献６５0
第八章质谱法６５1
第一节概述６５1
第二节质谱仪的类型６５3
一、扇形磁场质谱仪６５3
(一)单聚焦质谱仪６５3
(二)双聚焦质谱仪６５4
二、四极和离子阱质谱仪６５5
(一)ｍａｔｈｉｅｕ方程６57
(二)离子轨道的稳定区６58
三、飞行时间质谱法６６0
(一)基本原理６６0
(二)质量分辨率６６1
(三)质量测定６６2
(四)数据采集速度和灵敏度６６2
(五)脉冲、垂直引出和连续离子源６６3
四、傅里叶变换质谱法６６3
(一)基本原理６６4
(二)ftms的结构与实验程序６67
第三节离子化方法６７4
一、电子轰击离子化６７4
二、化学离子化６７4
三、激光解吸离子化６76
(一)常用基质６77
(二)离子的形成６79
(三)样品制备及基质选择６79
四、大气压离子化质谱法６８2
(一)apci原理６８2
(二)esi原理６８3
第四节进样系统及联用技术６87
一、直接进样杆６87
二、加热贮槽进样器６87
三、气相色谱仓势琢用技术６88
(一)色谱柱６88
(二)接口６88
四、液相色谱仓势追ǎ88
(一)大气压离子化接口６89
(二)其他接口６９2
(三)串联质谱和多级质谱法６９3
(四)lc瞞s样品制备６９4
第五节应用实例６９5
一、定性应用６９5
(一)合成药物的确证６９5
(二)副反应产物的鉴定696
(三)药物中有关物质和降解产物的分析698
(四)中药未知成分的鉴定７０1
(五)挥发油化学成分的gc瞞s分析７０2
(六)药物代谢研究７０4
(七)蛋白质分子量的测定７１0
(八)寡肽的氨基酸序列分析７１0
(九)生物分子的非共价复合物７１3
(十)微生物聚酯的多级质谱分析７１3
(十一)ｈｐｌｃ玻澹螅椋恚蠹埃韆lｄｉ玻簦铮妫恚蠓治鲋刈槿舜俸煜赴生成素的3个氮
连接寡糖位点的微不均一性７１4
二、定量应用７17
参考文献７２0
附录药品质量标准分析方法验证７22