Condensed protocols from molecular cloning:a laboratory manual
副标题:无
作 者:(美)J. 萨姆布鲁克(Joseph Sambrook),(美)D. W.拉塞尔(David W. Russell)著;黄培堂主译
分类号:
ISBN:9787122011480
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简介
《分子克隆实验指南》第三版作为一本准确、可靠、明晰的实验操作
手册,获得广泛的赞誉,已成为分子生物学工作者必备的案头工具书。
第三版在前两版的基础上对图书内容进行彻底的更新,修改了每一个
方案,增加了大量的新内容,拓宽了学科范围,涵盖了各类常规技术、成
熟技术和新技术,这些实验技术都是目前世界范围内分离、分析和克隆DNA
分子顶尖实验室日常工作中经常用到的。
本书是《分子克隆实验指南》第三版的精编版,著者将原第三版的实
验材料和操作技术部分抽出来并进行了适当的修正,从而使三卷本的大作
汇成了精悍的一本。精编版囊括了原第三版中的 “step-by-step”实验方
案以及精心选择的附录部分,经原第三版的相同译者翻译并认真校订为中
文,在准确性、实用性方面都有所增强。
精编版专为实验台边的工作者设计,对于遗传学、分子生物学、细胞
生物学、发育生物学、神经科学和免疫学专业的学生具有无与伦比的价值
,同时给单个研究者提供了“一书在手、方案全览”的便利。
目录
第1章 分子克隆中使用的质粒载体的制备
方案1.1 SDS碱裂解法制备质粒DNA:小量制备
方案1.2 SDS碱裂解法制备质粒DNA:中量制备
方案1.3 SDS碱裂解法制备质粒DNA:大量制备
方案1.4 煮沸法小量制备质粒DNA
方案1.5 煮沸法大量制备质粒DNA
方案1.6 用牙签挑取菌落小量制备质粒DNA
方案1.7 SDS裂解法制备质粒DNA
方案1.8 聚乙二醇沉淀法纯化质粒DNA
方案1.9 层析法纯化质粒DNA
方案1.10 氯化铯蹭寤乙锭梯度平衡离心法纯化闭环DNA:连续梯度法
方案1.11 氯化铯蹭寤乙锭梯度平衡离心法纯化闭环DNA:不连续梯度法
方案1.12 有机溶剂萃取法从DNA中去除溴化乙锭
方案1.13 离子交换层析法从DNA中去除溴化乙锭
方案1.14 NaCl离心法去除质粒DNA样品中的小片段核酸
方案1.15 Sephacryl S-1000层析法去除质粒DNA样品中的小片段核酸
方案1.16 氯化锂沉淀法去除质粒DNA样品中的小片段核酸
方案1.17 在质粒载体中进行定向克隆
方案1.18 在黏性末端上连接接头
方案1.19 在质粒载体中进行平末端克隆
方案1.20 质粒DNA的去磷酸化
方案1.21 平末端DNA连接合成的接头
方案1.22 在低熔点琼脂糖中连接质粒和目的DNA
方案1.23 制备和转化大肠杆菌感受态的Hanahan 方法:高效的转化 方法
方案1.24 制备和转化感受态大肠杆菌的Inoue 方法:超级感受态细胞
方案1.25 氯化钙制备大肠杆菌感受态
方案1.26 大肠杆菌的电转化
方案1.27 用X-gal和IPTG筛选细菌克隆:α互补
方案1.28 小量细菌克隆的杂交筛选
方案1.29 中量细菌克隆的杂交筛选
方案1.30 大量菌落的杂交筛选
方案1.31 菌落的裂解和DNA与滤膜的结合
方案1.32 在滤膜上进行细菌DNA的杂交
第2章 λ噬菌体及其载体
第3章 M13噬菌体载体
第4章 高容量载体的应用
第5章 DNA凝胶电泳和脉冲场琼脂糖凝胶电泳
第6章 真核基因组DNA的制备和分析
第7章 真核细胞mRNA的提取、纯化和分析
第8章 聚合酶链反应体外扩增DNA
第9章 放射性标记DNA探针与RNA探针的制备
第10章 人工合成的寡核苷酸探针
第11章 cDNA文库制备及基因鉴定
第12章 DNA测序
第13章 诱变
第14章 表达文库的筛选
第15章 克隆基因在大肠杆菌中的表达
第16章 克隆基因转入培养的哺乳动物细胞
第17章 哺乳动物细胞基因表达分析
第18章 蛋白质相互作用研究技术
附录
索引
方案1.1 SDS碱裂解法制备质粒DNA:小量制备
方案1.2 SDS碱裂解法制备质粒DNA:中量制备
方案1.3 SDS碱裂解法制备质粒DNA:大量制备
方案1.4 煮沸法小量制备质粒DNA
方案1.5 煮沸法大量制备质粒DNA
方案1.6 用牙签挑取菌落小量制备质粒DNA
方案1.7 SDS裂解法制备质粒DNA
方案1.8 聚乙二醇沉淀法纯化质粒DNA
方案1.9 层析法纯化质粒DNA
方案1.10 氯化铯蹭寤乙锭梯度平衡离心法纯化闭环DNA:连续梯度法
方案1.11 氯化铯蹭寤乙锭梯度平衡离心法纯化闭环DNA:不连续梯度法
方案1.12 有机溶剂萃取法从DNA中去除溴化乙锭
方案1.13 离子交换层析法从DNA中去除溴化乙锭
方案1.14 NaCl离心法去除质粒DNA样品中的小片段核酸
方案1.15 Sephacryl S-1000层析法去除质粒DNA样品中的小片段核酸
方案1.16 氯化锂沉淀法去除质粒DNA样品中的小片段核酸
方案1.17 在质粒载体中进行定向克隆
方案1.18 在黏性末端上连接接头
方案1.19 在质粒载体中进行平末端克隆
方案1.20 质粒DNA的去磷酸化
方案1.21 平末端DNA连接合成的接头
方案1.22 在低熔点琼脂糖中连接质粒和目的DNA
方案1.23 制备和转化大肠杆菌感受态的Hanahan 方法:高效的转化 方法
方案1.24 制备和转化感受态大肠杆菌的Inoue 方法:超级感受态细胞
方案1.25 氯化钙制备大肠杆菌感受态
方案1.26 大肠杆菌的电转化
方案1.27 用X-gal和IPTG筛选细菌克隆:α互补
方案1.28 小量细菌克隆的杂交筛选
方案1.29 中量细菌克隆的杂交筛选
方案1.30 大量菌落的杂交筛选
方案1.31 菌落的裂解和DNA与滤膜的结合
方案1.32 在滤膜上进行细菌DNA的杂交
第2章 λ噬菌体及其载体
第3章 M13噬菌体载体
第4章 高容量载体的应用
第5章 DNA凝胶电泳和脉冲场琼脂糖凝胶电泳
第6章 真核基因组DNA的制备和分析
第7章 真核细胞mRNA的提取、纯化和分析
第8章 聚合酶链反应体外扩增DNA
第9章 放射性标记DNA探针与RNA探针的制备
第10章 人工合成的寡核苷酸探针
第11章 cDNA文库制备及基因鉴定
第12章 DNA测序
第13章 诱变
第14章 表达文库的筛选
第15章 克隆基因在大肠杆菌中的表达
第16章 克隆基因转入培养的哺乳动物细胞
第17章 哺乳动物细胞基因表达分析
第18章 蛋白质相互作用研究技术
附录
索引
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