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简介
全国高等农业院校统编教材“动物生物化学实验指导”,自1984年编写至今已10余年,曾10余次印刷,是高等农业院校的基本实验教材。随着学科的发展,原书内容已十分陈旧,需要进行修改。
鉴于当时的情况,原书中的内容,除部分是与课程内容相关的验证性实验外,主要是动物血液生化成分的测定方法,但生化实验方法与技术操作训练的内容较少。
而今,血液生化成分手工测定的3-法,正在被“自动生化分析仪”所取代,有些测定方法已被淘汰。更重要的是随着蛋白质结构与功能以及核酸(DNA、RNA)体外操作研究的发展,促进了生物化学实验方法与技术的全面发展,尤其是20世纪70年代初DNA重组技术的创立及相关新技术的不断涌现,已形成新的分子生物学技术,从而更加丰富和发展了生物化学实验方法与技术,使之成为当今生物科学研究的重要手段;成为生物科学工作者必备的知识。
目录
目录
I 离心技术
实验1 实验基本知识与操作
实验2 血液样品的处理及组织匀浆的制备
实验3 唾液淀粉酶活性的观察
实验4 琥珀酸脱氢酶的作用及其竞争性抑制的观察
实验5 牛乳中蛋白质的提取与鉴定
实验6 肝糖原的提取与鉴定
实验7 脂肪酸的β一氧化——酮体测定法
实验8 动物组织中核酸的提取与鉴定
实验9 维生素C的提取与含量测定
实验10 维生素B〓的提取与含量测定
Ⅱ 光谱光度技术
实验11 血液葡萄糖的测定
实验12 血清总蛋白、清蛋白及球蛋白的测定
实验13 血液非蛋白氮(NPN)的测定
实验14 蛋白质的含量测定
实验15 核酸(DNA、RNA)总磷量测定
实验16 紫外吸收光谱法测定核酸类物质
实验17 化学法测定DNA的含量
实验18 碱性磷酸酶的活性及比活性测定
实验19 碱性磷酸酶Km值的测定
Ⅲ 生物大分子物质制备的基本技术
实验20 血浆IgG的分离制备
实验21 细胞色素C的制备
实验22 碱性磷酸酶的分离制备
实验23 猪胰蛋白酶的制备
实验24 鸡卵类黏蛋白的制备
实验25 动物组织中DNA的制备
实验26 动物肝脏中总RNA的制备
Ⅳ 层析技术
实验27 纸层析法鉴定酶促转氨基作用
实验28 脂质的提取和薄层层析
实验29 Edman法分析蛋白质及多肽的N一末端氨基酸
实验30 DNS-Cl法分析蛋白质及多肽的N一末端氨基酸
实验31 凝胶柱层析法
实验32 盐析产品(IgG)的凝胶层析法脱盐
实验33 DEAE一离子交换剂纯化血浆IgG
实验34 树脂离子交换剂纯化细胞色素C
实验35 CM-纤维素离子交换剂纯化猪胰蛋白酶
实验36 亲和层析剂纯化猪胰蛋白酶
V 电泳技术
实验37 血清蛋白质醋酸纤维薄膜电泳法
实验38 聚丙烯酰胺凝胶柱状电泳法
实验39 SDS一聚丙烯酰胺凝胶电泳法测定蛋白质的分子量
实验40 聚丙烯酰胺梯度凝胶电泳法测定蛋白质的分子量
实验41 凝胶等电聚焦电泳法测定蛋白质等电点
实验42 琼脂糖凝胶电泳法分离核酸
实验43 琼脂糖凝胶电泳法分离乳酸脱氢酶同工酶
实验44 免疫电泳法
实验45 轮状病毒RNA的制备及其基因结构的电泳分析
Ⅵ 免疫化学技术
实验46 抗血清的制备
实验47 抗血清效价及纯度测定法
实验48 酶联免疫吸附测定法(ELISA)
实验49 Western印迹法鉴定牛血清IgG
Ⅷ DNA重组技术
实验50 质粒DNA的提取与鉴定
实验51 EcoRI酶切质粒pBR322的反应及其鉴定
实验52 用质粒DNA转化E.coli及转化结果的检测
附录
一 量器的校正
二 常用数据表
三 常用缓冲溶液的配制方法
四 层析技术常用数据
五 硫酸铵饱和度常用表
六 核苷、核苷酸及其衍生物的一些物理常数
参考文献
I 离心技术
实验1 实验基本知识与操作
实验2 血液样品的处理及组织匀浆的制备
实验3 唾液淀粉酶活性的观察
实验4 琥珀酸脱氢酶的作用及其竞争性抑制的观察
实验5 牛乳中蛋白质的提取与鉴定
实验6 肝糖原的提取与鉴定
实验7 脂肪酸的β一氧化——酮体测定法
实验8 动物组织中核酸的提取与鉴定
实验9 维生素C的提取与含量测定
实验10 维生素B〓的提取与含量测定
Ⅱ 光谱光度技术
实验11 血液葡萄糖的测定
实验12 血清总蛋白、清蛋白及球蛋白的测定
实验13 血液非蛋白氮(NPN)的测定
实验14 蛋白质的含量测定
实验15 核酸(DNA、RNA)总磷量测定
实验16 紫外吸收光谱法测定核酸类物质
实验17 化学法测定DNA的含量
实验18 碱性磷酸酶的活性及比活性测定
实验19 碱性磷酸酶Km值的测定
Ⅲ 生物大分子物质制备的基本技术
实验20 血浆IgG的分离制备
实验21 细胞色素C的制备
实验22 碱性磷酸酶的分离制备
实验23 猪胰蛋白酶的制备
实验24 鸡卵类黏蛋白的制备
实验25 动物组织中DNA的制备
实验26 动物肝脏中总RNA的制备
Ⅳ 层析技术
实验27 纸层析法鉴定酶促转氨基作用
实验28 脂质的提取和薄层层析
实验29 Edman法分析蛋白质及多肽的N一末端氨基酸
实验30 DNS-Cl法分析蛋白质及多肽的N一末端氨基酸
实验31 凝胶柱层析法
实验32 盐析产品(IgG)的凝胶层析法脱盐
实验33 DEAE一离子交换剂纯化血浆IgG
实验34 树脂离子交换剂纯化细胞色素C
实验35 CM-纤维素离子交换剂纯化猪胰蛋白酶
实验36 亲和层析剂纯化猪胰蛋白酶
V 电泳技术
实验37 血清蛋白质醋酸纤维薄膜电泳法
实验38 聚丙烯酰胺凝胶柱状电泳法
实验39 SDS一聚丙烯酰胺凝胶电泳法测定蛋白质的分子量
实验40 聚丙烯酰胺梯度凝胶电泳法测定蛋白质的分子量
实验41 凝胶等电聚焦电泳法测定蛋白质等电点
实验42 琼脂糖凝胶电泳法分离核酸
实验43 琼脂糖凝胶电泳法分离乳酸脱氢酶同工酶
实验44 免疫电泳法
实验45 轮状病毒RNA的制备及其基因结构的电泳分析
Ⅵ 免疫化学技术
实验46 抗血清的制备
实验47 抗血清效价及纯度测定法
实验48 酶联免疫吸附测定法(ELISA)
实验49 Western印迹法鉴定牛血清IgG
Ⅷ DNA重组技术
实验50 质粒DNA的提取与鉴定
实验51 EcoRI酶切质粒pBR322的反应及其鉴定
实验52 用质粒DNA转化E.coli及转化结果的检测
附录
一 量器的校正
二 常用数据表
三 常用缓冲溶液的配制方法
四 层析技术常用数据
五 硫酸铵饱和度常用表
六 核苷、核苷酸及其衍生物的一些物理常数
参考文献
动物生物化学实验指导[电子资源.图书]
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