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简介
《基础分子生物学实验》涵盖了分子生物学实验8方面的内容,包括DNA基本实验技术,质粒DNA的分离纯化、鉴定及其转化和序列分析;RNA基本实验技术,总RNA、MRNA分离纯化及其鉴定,CDNA文库构建及筛选;PCR基因扩增技术,基因片段的扩增和基因突变;蛋白质及蛋白质组学分析技术,蛋白质的克隆及其表达、亲和层析技术纯化表达蛋白和双向电泳技术分析表达蛋白;基因表达研究技术,原位杂交技术,Southern、Northern杂交技术和定点突变技术;基因敲除技术,植物基因敲除技术;蛋白质及RNA相互作用,酵母双杂交系统研究蛋白质相互作用及RNAi技术研究;其他分子生物学实验技术,凝胶滞缓实验、噬菌体展示技术和蛋白质磷酸化分析等。
目录
基础篇
实验1质粒dna的分离纯化
实验2质粒dna的限制性内切酶酶切及琼脂糖凝胶电泳分离和鉴定
实验3e. coli感受态细胞的制备及质粒dna分子导入原核细胞
实验4阿拉伯糖诱导的dna分子快速导入原核细胞
实验5植物基因转化
实验6绿色荧光蛋白基因重组与鉴定
实验7利用pcr技术扩增gfp基因
实验8gfp基因在原核生物中的表达
实验9利用sds瞤age和蛋白质转移电泳鉴定重组蛋白
实验10蛋白质转移检测生物大分子
实验11基因定点突变技术
实验12绿色荧光蛋白的基因突变及其在e. coli中的表达
实验13dna核苷酸序列分析
实验14绿色荧光蛋白的分离、纯化及鉴定
实验15绿色荧光蛋白补入赘孰淖硫酶基因融合及其表达
实验16携带温度敏感型基因表达载体的构建及其鉴定
实验17pfu dna聚合酶基因的克隆与表达及其分离纯化
提高篇
实验18cdna文库的构建
.实验19cdna文库的筛选
实验20在酵母中表达高等真核生物基因
实验21植物基因敲除
实验22rnai技术研究
实验23质粒dna的分子杂交
实验24rna分子杂交
实验25组织原位杂交技术
实验26凝胶滞缓实验
实验27蛋白质磷酸化分析
实验28酵母双杂交系统研究蛋白质相互作用
实验29聚丙烯酰胺凝胶双向电泳
实验30亲和层析法分离胰蛋白酶
附录篇
附录1实验室常用试剂配制
附录2实验室常用缓冲溶液的配制方法
实验1质粒dna的分离纯化
实验2质粒dna的限制性内切酶酶切及琼脂糖凝胶电泳分离和鉴定
实验3e. coli感受态细胞的制备及质粒dna分子导入原核细胞
实验4阿拉伯糖诱导的dna分子快速导入原核细胞
实验5植物基因转化
实验6绿色荧光蛋白基因重组与鉴定
实验7利用pcr技术扩增gfp基因
实验8gfp基因在原核生物中的表达
实验9利用sds瞤age和蛋白质转移电泳鉴定重组蛋白
实验10蛋白质转移检测生物大分子
实验11基因定点突变技术
实验12绿色荧光蛋白的基因突变及其在e. coli中的表达
实验13dna核苷酸序列分析
实验14绿色荧光蛋白的分离、纯化及鉴定
实验15绿色荧光蛋白补入赘孰淖硫酶基因融合及其表达
实验16携带温度敏感型基因表达载体的构建及其鉴定
实验17pfu dna聚合酶基因的克隆与表达及其分离纯化
提高篇
实验18cdna文库的构建
.实验19cdna文库的筛选
实验20在酵母中表达高等真核生物基因
实验21植物基因敲除
实验22rnai技术研究
实验23质粒dna的分子杂交
实验24rna分子杂交
实验25组织原位杂交技术
实验26凝胶滞缓实验
实验27蛋白质磷酸化分析
实验28酵母双杂交系统研究蛋白质相互作用
实验29聚丙烯酰胺凝胶双向电泳
实验30亲和层析法分离胰蛋白酶
附录篇
附录1实验室常用试剂配制
附录2实验室常用缓冲溶液的配制方法
Laboratory experiments in molecular biology
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