基因工程原理与技术

目 录
**章 基因工程实验室基本要求和常规仪器设备 （1）
**节 实验室安全和基本环境要求 （1）
第二节 实验室常规仪器和设备 （7）
第三节 实验室灭菌、消毒技术 （23）
第二章 核酸电泳技术 （29）
**节 核酸电泳的原理 （29）
第二节 影响核酸电泳的因素 （32）
第三节 核酸的检测方法 （37）
第四节 核酸琼脂糖凝胶电泳 （41）
第五节 聚丙烯酰胺凝胶电泳 （51）
第三章 核酸工具酶 （54）
**节 限制性核酸内切酶 （54）
第二节 连接酶 （67）
第三节 DNA聚合酶 （73）
第四节 DNA修饰酶 （79）
第五节 核酸酶 （80）
第四章 核酸的分离纯化 （84）
**节 核酸分离纯化的基本知识 （84）
第二节 核酸分离纯化的基本原则 （91）
第五章 PCR的原理和应用 （102）
**节 PCR技术的原理 （102）
第二节 PCR反应系统 （105）
第三节 PCR常规技术及其延伸技术 （113）
第四节 实时荧光定量PCR （117）
第六章 基因工程常用载体 （125）
**节 基因工程载体的概述 （125）
第二节 质粒载体 （128）
第三节 λ噬菌体载体 （136）
第四节 噬菌粒载体 （139）
第五节 柯斯质粒载体 （140）
第七章 目的基因的克隆 （142）
**节 目的基因的克隆策略 （142）
第二节 基因组文库的构建 （150）
第三节 cDNA文库的构建 （154）
第四节 核酸探针的制备 （162）
第八章 重组子的构建、转化和筛选 （167）
**节 连接方式 （167）
第二节 重组子的构建策略 （171）
第三节 重组子导入受体细胞 （178）
第四节 重组子的筛选方法 （182）
第九章 大肠杆菌表达系统 （186）
**节 基因表达系统概述 （186）
第二节 大肠杆菌表达系统的主要表达元件 （188）
第三节 常见的大肠杆菌表达系统 （191）
第四节 外源基因在大肠杆菌中表达的主要影响因素 （194）
第十章 酵母表达系统 （207）
**节 酵母表达系统的发展 （207）
第二节 酵母的克隆载体类型 （209）
第三节 酵母表达系统主要构成要素 （212）
第四节 常用的酵母表达系统 （216）
第五节 外源基因在酵母中表达的基本策略 （221）
主要参考文献 （225）