简介
刘静主编的《分子生物学实验指导（供基础临床口腔预防医学类生物科学专业用）》围绕基因结构、表达和功能分析这条主线，主要涵盖了核酸蛋白的分离与检测、基因克隆、基因功能细胞水平验证和生物信息学分析4大方面。具体内容上，除了分子生物学实验室安全规则和常规设备的介绍外，共囊括了47项实验，且部分实验又包括了数个分实验。对于每项实验，本教材以着重介绍基本原理、材料准备、操作步骤和注意事项等环节，深入浅出，图文并茂。在编写风格上，很多编者融入了自身的工作经验和体会，注重实用性、通用性和可行性。
目录
分子生物学实验室安全规则
1.实验室药品试剂使用的注意事项
2.处理生物类废弃物的基本方法
3.实验室易制毒化学品
分子生物学实验室常规设备简介
1.实验室操作及分析仪器室
2.离心机室
3.细胞培养室
4.细菌培养室
5.放射性核素操作室
6.暗室
7.其他设备
分子生物学常用实验技术
1.电泳
1.1 琼脂糖凝胶电泳
1.2 聚丙烯酰胺凝胶电泳
2.哺乳动物外周血白细胞高分子质量DNA的提取
2.1 硅基质膜吸附柱法
2.2 NH4Ac—核酸沉淀法
3.核酸浓度测定
3.1 紫外线分光光度法（紫外线吸收法）
3.2 溴乙锭—琼脂糖凝胶电泳法（荧光光度法）
4.限制性核酸内切酶消化DNA
5.凝胶电泳回收DNA（柱回收法）
6.DNA分子的体外连接
7.感受态细胞制备及大肠埃希菌转化
8.重组质粒的筛选和鉴定
8.1 插入失活
8.2 d互补（蓝—白筛选）
8.3 酶切鉴定
9.质粒DNA的提取与纯化（碱裂解法）
10.Southern印迹杂交
11.探针标记和核酸分子杂交
11.1 利用32P标记DNA探针进行核酸分子杂交分析
11.2 采用地高辛标记DNA探针进行核酸分子杂交分析
12.细胞总RNA的提取
12.1 哺乳动物细胞RNA的提取
12.2 TRIzol试剂提取哺乳动物细胞RNA
12.3 哺乳动物细胞RNA提取（离心柱型）
12.4 植物总RNA的提取
13.Northern印迹杂交
14.PCR和RT—PCR
15.实时荧光定量PCR
16.DNA定点诱变技术
17.PCR—SSCP分析
18.细胞蛋白质提取
18.1 细胞总蛋白提取
18.2 胞浆、胞核蛋白提取
19.外源基因在大肠埃希菌中表达和蛋白质纯化
20.蛋白质浓度测定（BCA法）
21.蛋白质免疫印迹法
22.细胞培养
22.1 细胞原代培养
22.2 细胞传代培养
22.3 培养用品的清洗和消毒灭菌
22.4 细胞计数方法和细胞活力鉴定方法
23.细胞转染
23.1 磷酸钙转染法
23.2 脂质体转染法
24.细胞增殖检测
24.1 细胞生长曲线
24.2 CCK一8测定细胞活力
24.3 细胞集落形成实验
25.细胞凋亡检测
25.1 常规琼脂糖凝胶电泳
25.2 Annexin—V／PI法检测细胞凋亡
26.流式细胞术检测细胞周期
27.细胞划痕实验
28.细胞Transwell侵袭实验
29.双荧光素酶服告基因实验
30.RNA干扰技术
30.1 SiRNA干扰技术
30.2 慢病毒干扰技术
31.染色质免疫共沉淀技术（ChIP）
32.凝胶迁移阻滞实验（EMSA）
33.DNase I足纹分析法
34.RNA免疫共沉淀（RIP）
35.蛋白质的相互作用
35.1 免疫共沉淀
35.2 酵母双杂交法
36.GST pull—down实验
37.细胞免疫荧光染色
38.免疫组化
39.激光共聚焦荧光显微镜检测技术
40.基因启动子区CpG岛预测及甲基化PCR引物设计
41.甲基化特异性PCR
42.miRlNA的提取和富集
42.1 常规分离方法
42.2 硅基质离心柱法
43.miRNA靶基因的生物信息学预测
43.1 常用miRNA靶基因预测软件简介
43.2 预测软件使用
44.文库构建
44.1 基因组DNA文库构建
44.2 cDNA文库构建
44.3 文库的筛选与鉴定
45.常用生物信息学数据库
45.1 常用核酸序列数据库
45.2 常用蛋白质序列数据库
46.核酸序列分析
46.1 序列比对
46.2 开放阅读框分析
46.3 限制性核酸内切酶酶切位点分析
46.4 基序的查找
46.5 外显子、内含子剪切位点分析
47.蛋白质序列分析
47.1 蛋白质的理化性质分析
47.2 蛋白质的疏水性分析
47.3 蛋白质的跨膜结构分析
47.4 信号肽的预测和识别
47.5 蛋白质的卷曲螺旋预测
47.6 磷酸化位点的预测与识别
1.实验室药品试剂使用的注意事项
2.处理生物类废弃物的基本方法
3.实验室易制毒化学品
分子生物学实验室常规设备简介
1.实验室操作及分析仪器室
2.离心机室
3.细胞培养室
4.细菌培养室
5.放射性核素操作室
6.暗室
7.其他设备
分子生物学常用实验技术
1.电泳
1.1 琼脂糖凝胶电泳
1.2 聚丙烯酰胺凝胶电泳
2.哺乳动物外周血白细胞高分子质量DNA的提取
2.1 硅基质膜吸附柱法
2.2 NH4Ac—核酸沉淀法
3.核酸浓度测定
3.1 紫外线分光光度法（紫外线吸收法）
3.2 溴乙锭—琼脂糖凝胶电泳法（荧光光度法）
4.限制性核酸内切酶消化DNA
5.凝胶电泳回收DNA（柱回收法）
6.DNA分子的体外连接
7.感受态细胞制备及大肠埃希菌转化
8.重组质粒的筛选和鉴定
8.1 插入失活
8.2 d互补（蓝—白筛选）
8.3 酶切鉴定
9.质粒DNA的提取与纯化（碱裂解法）
10.Southern印迹杂交
11.探针标记和核酸分子杂交
11.1 利用32P标记DNA探针进行核酸分子杂交分析
11.2 采用地高辛标记DNA探针进行核酸分子杂交分析
12.细胞总RNA的提取
12.1 哺乳动物细胞RNA的提取
12.2 TRIzol试剂提取哺乳动物细胞RNA
12.3 哺乳动物细胞RNA提取（离心柱型）
12.4 植物总RNA的提取
13.Northern印迹杂交
14.PCR和RT—PCR
15.实时荧光定量PCR
16.DNA定点诱变技术
17.PCR—SSCP分析
18.细胞蛋白质提取
18.1 细胞总蛋白提取
18.2 胞浆、胞核蛋白提取
19.外源基因在大肠埃希菌中表达和蛋白质纯化
20.蛋白质浓度测定（BCA法）
21.蛋白质免疫印迹法
22.细胞培养
22.1 细胞原代培养
22.2 细胞传代培养
22.3 培养用品的清洗和消毒灭菌
22.4 细胞计数方法和细胞活力鉴定方法
23.细胞转染
23.1 磷酸钙转染法
23.2 脂质体转染法
24.细胞增殖检测
24.1 细胞生长曲线
24.2 CCK一8测定细胞活力
24.3 细胞集落形成实验
25.细胞凋亡检测
25.1 常规琼脂糖凝胶电泳
25.2 Annexin—V／PI法检测细胞凋亡
26.流式细胞术检测细胞周期
27.细胞划痕实验
28.细胞Transwell侵袭实验
29.双荧光素酶服告基因实验
30.RNA干扰技术
30.1 SiRNA干扰技术
30.2 慢病毒干扰技术
31.染色质免疫共沉淀技术（ChIP）
32.凝胶迁移阻滞实验（EMSA）
33.DNase I足纹分析法
34.RNA免疫共沉淀（RIP）
35.蛋白质的相互作用
35.1 免疫共沉淀
35.2 酵母双杂交法
36.GST pull—down实验
37.细胞免疫荧光染色
38.免疫组化
39.激光共聚焦荧光显微镜检测技术
40.基因启动子区CpG岛预测及甲基化PCR引物设计
41.甲基化特异性PCR
42.miRlNA的提取和富集
42.1 常规分离方法
42.2 硅基质离心柱法
43.miRNA靶基因的生物信息学预测
43.1 常用miRNA靶基因预测软件简介
43.2 预测软件使用
44.文库构建
44.1 基因组DNA文库构建
44.2 cDNA文库构建
44.3 文库的筛选与鉴定
45.常用生物信息学数据库
45.1 常用核酸序列数据库
45.2 常用蛋白质序列数据库
46.核酸序列分析
46.1 序列比对
46.2 开放阅读框分析
46.3 限制性核酸内切酶酶切位点分析
46.4 基序的查找
46.5 外显子、内含子剪切位点分析
47.蛋白质序列分析
47.1 蛋白质的理化性质分析
47.2 蛋白质的疏水性分析
47.3 蛋白质的跨膜结构分析
47.4 信号肽的预测和识别
47.5 蛋白质的卷曲螺旋预测
47.6 磷酸化位点的预测与识别
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