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简介
《生物化学与分子生物学实验》分为分子生物学实验及生物化学实验两部分,共没计了24个综合性较强的实验,其中14个分子生物学实验以应用广泛的绿色荧光蛋白基因为主线贯穿,涵盖了分子生物学的基本实验技术,包括原核生物细胞转化。质粒DNA的分离纯化,限制性内切酶对质粒DNA的酶切与琼脂糖凝胶电泳鉴定,重组技术,PCR基因扩增,基因突变技术,蛋白质电泳分离表达蛋白,蛋白质转移技术,蛋白质分离纯化技术等。10个生物化学实验涉及常用的电泳技术、亲和色谱技术和免疫学实验技术。《生物化学与分子生物学实验》作为普通高等教育“十一五”国家级规划教材,是北京大学多年实验教学改革的成果,充分体现了实验内容的综合性。通过学习和训练,学生们在创新性思维和科研动手能力上都会得到很大提高,适合高等院校生命科学类专业本科生和研究生使用。
目录
第一部分 分子生物学实验
背景资料
实验1 绿色荧光蛋白(GFP)基因转入原核细胞
实验2 目的基因载体的分离纯化与质量测定
实验3 含绿色荧光蛋白基因载体的酶切与电泳鉴定
实验4 增强型绿色荧光蛋白基因表达载体的构建
实验5 绿色荧光蛋白基因的表达与鉴定
实验6 PCR体外扩增绿色荧光蛋白基因及其克隆与表达
实验7 红色荧光蛋白、黄色荧光蛋白基因的克隆和在大肠杆菌中的表达
实验8 谷胱甘肽转硫酶一绿色荧光蛋白融合蛋白的基因克隆及其表达
实验9 增强型绿色荧光蛋白的定点突变及表达检测
实验10 携带增强型绿色荧光蛋白报告基因的温度敏感型表达载体的构建、鉴定和表达量的测定
附录10-1:pBV220全序列(从ZCoRI酶切位点第一个A开始)
附录10-2:EGFP基因全序列
实验11 双报告基因系统的构建及初步检测
附录11-1:L、aciferase基因全序列
附录11-2:萤光素酶检测步骤
实验12 以绿色荧光蛋白(GFP)为报告基因构建重组酵母检测环境中雌二醇的含量
实验13 绿色荧光蛋白的分离、纯化及其鉴定
实验14 谷胱甘肽转硫酶与绿色荧光蛋白融合蛋白的分离、纯化和酶学的测定
附录Ⅰ
第二部分 生物化学实验
电泳技术
实验15 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳
实验16 聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦电泳
实验17 聚丙烯酰胺凝胶双向电泳亲和色谱技术
实验18 鸡卵黏蛋白的分离纯化
实验19 胰蛋白酶粗提取与活性测定
实验20 亲和色谱分离胰蛋白酶
实验21 胰蛋白酶动力学测定免疫学技术
实验22 抗血清的制备
实验23 抗血清抗体的测定
实验24 酶联免疫吸附测定
附录Ⅱ
背景资料
实验1 绿色荧光蛋白(GFP)基因转入原核细胞
实验2 目的基因载体的分离纯化与质量测定
实验3 含绿色荧光蛋白基因载体的酶切与电泳鉴定
实验4 增强型绿色荧光蛋白基因表达载体的构建
实验5 绿色荧光蛋白基因的表达与鉴定
实验6 PCR体外扩增绿色荧光蛋白基因及其克隆与表达
实验7 红色荧光蛋白、黄色荧光蛋白基因的克隆和在大肠杆菌中的表达
实验8 谷胱甘肽转硫酶一绿色荧光蛋白融合蛋白的基因克隆及其表达
实验9 增强型绿色荧光蛋白的定点突变及表达检测
实验10 携带增强型绿色荧光蛋白报告基因的温度敏感型表达载体的构建、鉴定和表达量的测定
附录10-1:pBV220全序列(从ZCoRI酶切位点第一个A开始)
附录10-2:EGFP基因全序列
实验11 双报告基因系统的构建及初步检测
附录11-1:L、aciferase基因全序列
附录11-2:萤光素酶检测步骤
实验12 以绿色荧光蛋白(GFP)为报告基因构建重组酵母检测环境中雌二醇的含量
实验13 绿色荧光蛋白的分离、纯化及其鉴定
实验14 谷胱甘肽转硫酶与绿色荧光蛋白融合蛋白的分离、纯化和酶学的测定
附录Ⅰ
第二部分 生物化学实验
电泳技术
实验15 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳
实验16 聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦电泳
实验17 聚丙烯酰胺凝胶双向电泳亲和色谱技术
实验18 鸡卵黏蛋白的分离纯化
实验19 胰蛋白酶粗提取与活性测定
实验20 亲和色谱分离胰蛋白酶
实验21 胰蛋白酶动力学测定免疫学技术
实验22 抗血清的制备
实验23 抗血清抗体的测定
实验24 酶联免疫吸附测定
附录Ⅱ
生物化学与分子生物学实验
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