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简介
从发酵酸菜中分离得到植物乳杆菌,通过基因敲除,使植物乳杆菌的
D-乳酸脱氢酶基因失活,建立了工程菌。工程菌的L-乳酸脱氢酶活力占总
乳酸脱氢酶活力的比例提高到92.5%,L-乳酸的比例提高到75.7%。对工
程菌的培养条件进行优化,15 L发酵罐中试发酵,得72 h最高产酸量为
31.1 g·L-1,产酸率比优化前提高了40.1%。应用于发酵黄瓜,使L-乳酸
的比例提高了14.8%。
目录
1 绪论
1.1 乳酸的理化性质
1.2 L-(+)-乳酸及其应用
1.3 L-乳酸生产的研究
1.4 发酵法生产L-乳酸的研究
1.5 植物乳杆菌的作用与应用
2 乳酸菌的分离和初步鉴定
2.1 乳酸菌的分离纯化
2.2 形态学鉴定
2.3 乳酸菌的生化鉴定
2.4 LactobacillusplantarumHF1生长产酸特性的研究
3 产高比例L-(+)-乳酸植物乳杆菌工程菌的构建
3.1 乳酸脱氢酶的催化反应机理
3.2 乳酸脱氢酶分子生物学研究
3.3 基因敲除的原理和在微生物育种上的应用
3.4 L-(+)-乳酸高产植物乳杆菌工程菌的构建
3.5 工程菌表达特性的研究
4 工程菌产乳酸发酵条件的优化
.1 L.plantarumHF1.1培养基的优化
4.2 发酵条件的优化
4.3 分批中试发酵的研究
4.4 补料发酵的研究
5 工程菌用于发酵黄瓜的研究
5.1 HF3和HF5生长曲线的研究
5.2 HF3和HF5最适生长温度的研究
5.3 菌种耐盐试验
5.4 混合菌种发酵试验
5.5 工程菌与野生菌对比试验
5.6 黄瓜中试发酵试验
6 工程菌构建与应用的探讨
6.1 发酵蔬菜中乳酸菌的分离和鉴定
6.2 植物乳杆菌HF1和HF1.1乳酸脱氢酶的测定
6.3 植物乳杆菌HF1和HF1.1乳酸旋光性的测定方法
6.4 基因敲除法建立植物乳杆菌工程菌的可行性探讨
6.5 敲除载体的构建
6.6 转化子的筛选和鉴定
6.7 工程菌表达的特点
6.8 工程菌发酵条件的优化
6.9 多菌株联合发酵生产乳酸黄瓜134
参考文献137
附录164
附录Ⅰ 培养基164
附录Ⅱ 试验菌株169
附录Ⅲ 仪器、设备和试剂170
附录Ⅳ 试剂配制172
1.1 乳酸的理化性质
1.2 L-(+)-乳酸及其应用
1.3 L-乳酸生产的研究
1.4 发酵法生产L-乳酸的研究
1.5 植物乳杆菌的作用与应用
2 乳酸菌的分离和初步鉴定
2.1 乳酸菌的分离纯化
2.2 形态学鉴定
2.3 乳酸菌的生化鉴定
2.4 LactobacillusplantarumHF1生长产酸特性的研究
3 产高比例L-(+)-乳酸植物乳杆菌工程菌的构建
3.1 乳酸脱氢酶的催化反应机理
3.2 乳酸脱氢酶分子生物学研究
3.3 基因敲除的原理和在微生物育种上的应用
3.4 L-(+)-乳酸高产植物乳杆菌工程菌的构建
3.5 工程菌表达特性的研究
4 工程菌产乳酸发酵条件的优化
.1 L.plantarumHF1.1培养基的优化
4.2 发酵条件的优化
4.3 分批中试发酵的研究
4.4 补料发酵的研究
5 工程菌用于发酵黄瓜的研究
5.1 HF3和HF5生长曲线的研究
5.2 HF3和HF5最适生长温度的研究
5.3 菌种耐盐试验
5.4 混合菌种发酵试验
5.5 工程菌与野生菌对比试验
5.6 黄瓜中试发酵试验
6 工程菌构建与应用的探讨
6.1 发酵蔬菜中乳酸菌的分离和鉴定
6.2 植物乳杆菌HF1和HF1.1乳酸脱氢酶的测定
6.3 植物乳杆菌HF1和HF1.1乳酸旋光性的测定方法
6.4 基因敲除法建立植物乳杆菌工程菌的可行性探讨
6.5 敲除载体的构建
6.6 转化子的筛选和鉴定
6.7 工程菌表达的特点
6.8 工程菌发酵条件的优化
6.9 多菌株联合发酵生产乳酸黄瓜134
参考文献137
附录164
附录Ⅰ 培养基164
附录Ⅱ 试验菌株169
附录Ⅲ 仪器、设备和试剂170
附录Ⅳ 试剂配制172
高产L-(+)-乳酸植物乳杆菌工程菌的构建与应用
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