生物化学实验指导教程（徐丹丹）

第一篇基础实验/1

实验一糖类的颜色反应1

一、α-萘酚反应（Molisch反应）1

二、间苯二酚反应（Seliwanoff反应）3

实验二糖类的还原作用5

实验三蒽酮比色法测定总糖含量8

实验四还原糖的测定——3,5-二硝基水杨酸比色法11

实验五邻甲苯胺法测定血糖14

糖类习题集16

实验六脂肪的粗提和定量测定18

实验七脂肪碘值的测定20

实验八脂肪的组成23

实验九卵磷脂的提取和鉴定26

实验十血清胆固醇的定量测定（醋酸酐法）28

脂类习题集30

实验十一蛋白质的性质实验——蛋白质及氨基酸的呈色反应32

一、双缩脲反应32

二、茚三酮反应34

三、黄色反应36

四、考马斯亮蓝反应38

实验十二蛋白质等电点的测定和蛋白质的沉淀反应40

一、蛋白质等电点的测定40

二、蛋白质的沉淀与变性42

三、尿蛋白定性检验46

实验十三酪蛋白的提取49

实验十四考马斯亮蓝G-250法（Bradford法）测定蛋白质的浓度51

实验十五蛋白质含量测定——微量凯氏定氮法54

实验十六双缩脲法测定蛋白质含量59

实验十七福林-酚试剂法（Lowry法）测定蛋白质61

实验十八血清蛋白质乙酸纤维素薄膜电泳63

实验十九垂直板聚丙烯酰胺凝胶电泳分离蛋白质67

实验二十SDS-PAGE电泳测定蛋白质分子量69

实验二十一蛋白质DNS分析法(DNS-Cl膜色谱技术)73

蛋白质的结构与功能习题集75

实验二十二哺乳动物基因组DNA的提取78

实验二十三植物基因组DNA的提取81

实验二十四应用PCR技术扩增DNA分子84

实验二十五DNA的琼脂糖凝胶电泳87

实验二十六酵母RNA的分离与组分鉴定91

核酸的结构与功能习题集93

实验二十七酶的特性96

一、温度对酶活力的影响96

二、pH对酶活力的影响98

三、唾液淀粉酶的活化和抑制100

四、酶的专一性102

实验二十八肝脏中转氨酶活力的测定106

实验二十九过氧化氢酶和过氧化物酶的作用109

实验三十碱性磷酸酶的分离与纯化112

酶类习题集114

实验三十一维生素C的定量测定——2,4-二硝基苯肼法119

实验三十二维生素A的定性测定123

实验三十三维生素B1的定性测定125

实验三十四胡萝卜素的定量测定127

维生素习题集129



第二篇综合实验/131

实验三十五小麦萌发前后淀粉酶活力的比较131

实验三十六酵母蔗糖酶的提取、纯化及效果分析135

实验三十七脲酶的分离纯化及酶学特性研究139

实验三十八大肠埃希菌质粒DNA的提取、酶切和琼脂糖凝胶电泳鉴定154



附录/159

一、实验室基本操作159

（一）玻璃仪器的洗涤159

（二）一些常用的清洗液159

（三）溶液的混匀160

二、常用仪器的使用和注意事项161

（一）移液器161

（二）电子天平162

（三）离心机163

（四）酸度计164

（五）紫外分光光度计166

三、试剂的配制及其分级168

（一）试剂配制的注意事项168

（二）几种常用缓冲液的配制169

（三）常用酸碱指示剂174

四、习题参考答案176