组织化学与细胞化学技术

第一章绪论 
　第一节组织化学发展的基础 
　　一、细胞生物学发展与组织化学 
　　二、生物化学发展与组织化学 
　　三、免疫学发展与组织化学 
　　四、分子生物学发展与组织化学 
　第二节组织化学发展简史 
　　一、组织化学的兴起 
　　二、早期组织化学的发展 
　　三、现代组织化学的发展 
　　四、我国组织化学发展概况 
　第三节组织化学技术分类与基本要求 
　　一、组织化学技术分类 
　　二、组织化学技术的基本要求 
第二章标本制备 
　第一节取材 
　　一、组织标本取材 
　　二、细胞标本取材 
　第二节固定 
　　一、常用固定剂 
　　二、固定方法 
　　三、培养细胞常用固定剂和使用方法 
　　四、组织固定后的洗涤 
　第三节包埋 
　　一、石蜡包埋 
　　二、火棉胶包埋 
　　三、树脂包埋 
　第四节切片 
　　一、石蜡切片 
　　二、冷冻切片 
　　三、振动切片 
　　四、火棉胶切片 
　　五、防脱片处理 
　第五节非切片标本制备 
　　一、细胞涂片标本 
　　二、组织分离标本 
　　三、组织磨片标本 
　　四、整体封存标本 
　　五、组织铺片标本 
　第六节标本封固 
　　一、封固剂 
　　二、封固方法 
　第七节组织芯片技术 
　　一、组织芯片的制备 
　　二、组织芯片结果分析 
　　三、组织芯片的优点与问题 
　第八节显微切割技术 
　　一、显微切割方式 
　　二、激光显微切割原理 
　　三、显微切割的材料准备 
　　四、激光显微切割技术的特点 
第三章常用组织学染色技术 
　第一节苏木精一伊红染色 
　　一、苏木精 
　　二、伊红 
　　三、苏木精—伊红染色方法 
　第二节常用特殊染色方法 
　　一、镀银染色 
　　二、尼氏染色 
　　三、Wright和Giemsa染色 
　　四、铁苏木精染色 
　　五、异染性染色 
　　六、三色法染色 
　　七、弹性纤维染色 
第四章光学显微镜技术 
　第一节普通光学显微镜 
　　一、普通光学显微镜的结构 
　　二、光学显微镜照明技术 
　　三、普通光学显微镜成像原理 
　　四、普通光学显微镜的光学参数 
　　五、普通光学显微镜操作方法 
　第二节倒置显微镜 
　第三节相差显微镜 
　　一、相差显微镜的结构与成像原理 
　　二、相差显微镜的操作方法 
　第四节微分干涉相差显微镜 
　　一、微分干涉相差显微镜的原理及结构 
　　二、微分干涉相差显微镜的成像光路系统调整方法 
　　三、注意事项 
　第五节霍夫曼显微镜 
　　一、霍夫曼显微镜的结构 
　　二、霍夫曼显微镜成像原理 
　第六节暗视野显微镜 
　　一、暗视野显微镜的结构特点与成像原理 
　　二、暗视野显微镜使用方法 
　第七节荧光显微镜 
　　一、荧光基础知识 
　　二、荧光显微镜的结构和成像原理 
　　三、荧光显微镜的操作方法和注意事项 
　　四、全内反射荧光显微镜 
　　五、超分辨率显微镜 
第五章电子显微镜技术 
　第一节透射电子显微镜技术 
　　一、透射电镜术的基本原理 
　　二、超薄切片技术 
　　三、观察与记录 
　　四、冷冻超薄切片技术 
　　五、冷冻断裂技术 
　第二节扫描电子显微镜技术 
　　一、扫描电镜术的基本原理 
　　二、扫描电镜生物样品制备基本方法 
　　三、特殊扫描电镜生物样品制备方法 
第六章组织化学技术 
　第一节核酸组织化学技术 
　　一、Feulgen反应 
　　二、甲基绿，派洛宁染色 
　　三、核酸荧光染色 
　第二节碳水化合物组织化学技术 
　　一、过碘酸一雪夫（PAS）反应 
　　二、阿利新蓝染色法 
　第三节脂类组织化学技术 
　　一、物理显色法 
　　二、化学显色法 
　第四节酶组织化学技术 
　　一、酶组织化学基本原理 
　　二、常用酶显示方法 
　　三、常用酶组织化学技术 
　　四、酶组织化学染色注意事项 
　第五节凝集素组织化学技术 
　　一、凝集素的标记物 
　　二、染色步骤 
　第六节生物胺荧光组织化学技术 
　　一、Falck—Hillarp甲醛诱发荧光法 
　　二、乙醛酸诱发生物单胺荧光法 
　　三、邻苯二醛显示组胺荧光法 
第七章免疫组织化学技术 
　第一节免疫组织化学技术概述 
　　一、免疫组织化学技术的基本原理 
　　二、免疫组织化学技术特点 
　　三、免疫组织化学技术分类 
　　四、免疫组织化学标本制备特点 
　　五、抗原修复 
　　六、免疫组织化学技术对照实验 
　第二节免疫荧光组织化学技术 
　　一、免疫荧光组织化学技术基本原理 
　　二、免疫荧光组织化学基本方法 
　　三、间接法免疫荧光单标染色操作步骤 
　　四、免疫荧光染色标本的复染 
　　五、非特异性荧光染色的抑制或消除 
　第三节免疫酶组织化学技术 
　　一、免疫酶组织化学基本原理 
　　二、免疫酶组织化学基本方法 
　　三、常用免疫酶组织化学技术操作步骤 
　　四、免疫酶组织化学染色注意事项 
　第四节亲和免疫组织化学技术 
　　一、亲和免疫组织化学技术基本原理 
　　二、亲和免疫组织化学技术基本方法 
　　三、亲和免疫组织化学技术操作步骤 
　第五节免疫金组织化学技术 
　　一、免疫胶体金技术 
　　二、蛋白A胶体金技术 
　　三、免疫金银染色 
　　四、光镜免疫胶体金技术操作步骤 
　第六节应用与标本同种属第一抗体的免疫组织化学技术 
　　一、第一抗体半抗原化法 
　　二、未结合Fab片段预孵育阻断法 
　第七节免疫组织化学增敏方法 
　　一、多聚螯合物酶法 
　　二’、催化信号放大系统 
　第八节双重或多重免疫组织化学染色技术 
　　一、双重或多重免疫组织化学基本方法 
　　二、常用双重免疫组织化学染色步骤 
　　三、双重或多重免疫组织化学染色注意事项 
　第九节免疫组织化学结果评价 
　　一、免疫组织化学染色结果判断原则 
　　二、非特异性染色 
　　三、常见问题与处理方法 
第八章原位杂交组织化学技术 
　第一节原位杂交组织化学基本原理 
　　一、核酸化学组成与基本结构 
　　二、DNA变性与复性 
　　三、核酸分子杂交 
　　四、核酸分子探针 
　　五、原位杂交组织化学技术的基本类型 
　第二节原位杂交组织化学技术的基本方法 
　　一、标本制备 
　　二、杂交前处理 
　　三、杂交反应 
　　四、杂交后处理 
　　五、杂交体检测 
　第三节荧光原位杂交技术 
　　一、荧光原位杂交探针 
　　二、荧光原位杂交技术类型 
　　三、多色荧光原位杂交技术 
　第四节原位PCR技术 
　　一、原位PCR的基本原理 
　　二、原位PCR技术类型 
　　三、原位PCR技术特点 
　第五节整胚原位杂交技术 
　第六节双重和多重原位杂交技术 
　　一、放射性核素和非放射性标记探针的双重标记原位杂交 
　　二、非放射性标记探针的双重标记原位杂交 
　　三、两种放射性核素标记探针的双重标记原位杂交 
　第七节原位杂交结合免疫组织化学技术 
　　一、原位杂交在先 
　　二、免疫组织化学在先 
　第八节电镜原位杂交技术 
　　一、电镜原位杂交的特点 
　　二、电镜原位杂交技术类型 
　第九节原位杂交组织化学技术进展 
　　一、原位启动标记技术 
　　二、肽—核酸原位杂交技术 
　　三、锁链探针原位杂交技术 
　第十节常用原位杂交技术实验步骤 
　　一、放射性核素标记DNA探针检测石蜡切片DNA 
　　二、地高辛标记cRNA探针冷冻切片mRNA检测 
　　三、染色体荧光原位杂交 
　　四、原位逆转录PCR 
　第十一节原位杂交组织化学结果评价 
　　一、对照实验 
　　二、常见问题与对策 
第九章电镜组织化学与免疫电镜技术 
　第一节电镜酶细胞化学技术 
　　一、电镜酶细胞化学基本原理 
　　二、电镜酶细胞化学标本制备 
　　三、电镜酶细胞化学结果观察 
　　四、常用电镜酶细胞化学方法 
　第二节免疫电镜技术 
　　一、免疫电镜技术的特点 
　　二、常用免疫电镜技术 
第十章神经束路示踪技术 
　第一节轴质运输示踪技术 
　　一、辣根过氧化物酶示踪法 
　　二、植物凝集素示踪法 
　　三、葡聚糖胺示踪法 
　　四、霍乱毒素示踪法 
　　五、荧光素示踪法 
　　六、病毒示踪法 
　　七、放射自显影示踪法 
　第二节变性示踪技术 
　　一、变性方法 
　　二、变性神经元鉴定 
　第三节电镜示踪技术 
　　一、正常与变性神经成分的鉴定 
　　二、电镜放射自显影示踪 
　　三、HRP法电镜示踪 
　　四、生物素化葡聚糖胺法电镜示踪 
　第四节双重或多重神经束路示踪技术 
　　一、双重或多重示踪的基本类型 
　　二、双重或多重示踪注意事项 
第十一章激光扫描共聚焦显微镜术 
　第一节激光扫描共聚焦显微镜技术的基本原理 
　　一、激光扫描共聚焦显微镜的基本结构 
　　二、激光扫描共聚焦显微镜的工作原理 
　　三、激光扫描共聚焦显微镜的主要类型 
　　四、激光扫描共聚焦显微镜图像采集和成像模式 
　第二节激光扫描共聚焦显微镜实验技术 
　　一、标本制备 
　　二、荧光标记 
　　三、结果判断与问题分析 
　　四、激光扫描共聚焦显微镜操作方法 
　第三节激光扫描共聚焦显微镜的主要应用 
　　一、组织细胞化学成分的定性、定位和定量分析 
　　二、生物结构的光学切片与三维重建 
　　三、活细胞内离子和pH值动态测定 
　　四、荧光漂白恢复技术 
　　五、荧光能量共振转移技术 
第十二章流式细胞术 
　第一节流式细胞仪 
　　一、流式细胞仪的发展 
　　二、流式细胞仪的基本结构 
　　三、流式细胞仪的工作原理 
　第二节流式细胞术样本制备 
　　一、单细胞悬液制备 
　　二、染色 
　第三节流式细胞术数据处理与分析 
　　一、数据采集 
　　二、数据存储 
　　三、数据分析 
　第四节流式细胞术的应用 
　　一、细胞表面标志物检测 
　　二、细胞内蛋白质检测 
　　三、DNA含量检测与细胞周期分析 
　　四、细胞凋亡检测 
　　五、细胞分选 
第十三章组织化学与细胞化学定量分析技术 
　第一节显微图像分析技术 
　　一、显微图像分析系统 
　　二、显微图像分析原理 
　　三、显微图像分析方法 
　　四、图像分析软件在组织化学与细胞化学定量分析中的应用 
　　五、显微图像分析注意事项 
　第二节体视学 
　　一、体视学的基本原理 
　　二、常用体视学方法 
第十四章显微摄影技术 
　第一节摄影基础 
　　一、照相机镜头 
　　二、感光胶片 
　　三、反差 
　　四、曝光控制 
　　五、色温 
　　六、滤色镜的应用 
　第二节显微摄影基本方法 
　　一、物镜和目镜的选用 
　　二、光路合轴 
　　三、光阑调节 
　　四、感光片的选用 
　　五、曝光补偿 
　　六、显微摄影的基本步骤 
　　七、特殊显微摄影技术 
　　八、显微照片放大倍数的计算 
　第三节数码显微摄影技术 
　　一、数码摄影基础 
　　二、数码显微摄影装置 
　　三、数码显微摄影基本方法 
第十五章组织化学与细胞化学技术实验指导 
　实验一组织标本石蜡切片和冷冻切片制备与HE染色 
　　一、石蜡切片制备 
　　二、冷冻切片标本制备 
　　三、HE染色 
　实验二DNA荧光组织化学染色 
　　一、DNA的Hoechst33258荧光组织化学染色 
　　二、DNA的DAPI荧光组织化学染色 
　实验三脂类的异丙醇油红O法染色 
　实验四碱性磷酸酶和酸性磷酸酶组织化学染色 
　　一、钙—钴法显示碱性磷酸酶 
　　二、偶联，偶氮色素法显示酸性磷酸酶 
　实验五胆碱酯酶Karnovsky—Roots法染色 
　实验六一氧化氮合酶的还原型辅酶Ⅱ—黄递酶染色法 
　实验七SABC法免疫组织化学染色与间接法双重免疫荧光染色 
　　一、免疫组织化学SABC法染色 
　　二、间接法双重免疫荧光染色 
　实验八半抗原标记cRNA探针原位杂交组织化学染色 
　实验九大鼠中缝大核向脊髓背角和延髓背角分支投射的双重荧光逆行示踪 
附录一组织化学与细胞化学染色常用试剂配制 
附录二原位杂交组织化学试剂配制