Experimental biology techniques: insights into overcoming challenges

第一篇 核酸技术
第一章 DNA提取和鉴定技术
第一节 如何获得高产量DNA
第二节 乙醇沉淀核酸中盐的作用
第三节 核酸抽提中乙醇洗涤的作用
第四节 DNA的聚丙烯酰胺凝胶电泳银染
第五节 荧光素酶双报告基因中调节目的质粒与内参质粒比例是关键
第二章 RNA提取技术
第一节 如何提高RNA提取质量
第二节 如何提高总RNA纯度和产量
第三节 RNA纯度对荧光定量RT—PCR准确性的影响
第四节 组织反复冻融易致RNA降解
第五节 谁动了我的细胞RNA
第三章 质粒提取和构建技术
第一节 质粒DNA提取实验的细节深究
第二节 质粒DNA电泳有几条带
第三节 质粒构建
第四节 灵活酶切以玩转克隆
第五节 分子克隆方法——细节决定成功
第四章 PCR技术
第一节 以V2R为例设计引物并使用BLAST验证
第二节 引物设计惑与获
第子节 引物二聚体终于消失了
第四节 PCR扩增实验污染的惨痛教训
第五节 如何减少PCR产物中的引物二聚体
第六节 昙花一现的PCR结果
第七节 如何获得完美的荧光定量PCR结果
第八节 实时荧光定量PCR中荧光定量标准曲线很重要
第九节 MicroRNA的荧光定量PCR检测之我见
第十节 残缺的芯片扫描图
第十一节 “假阳鬼子”和“拦路虎”
第十二节 PCR扩增攻略

第二篇 蛋白质技术
第一章 蛋白质电泳技术
第一节 讨厌的波浪线
第二节 冬天里的一把火
第三节 当头棒喝！蛋白质双向凝胶电泳聚不上焦
第四节 蛋白质双向凝胶电泳横条纹的教训
第五节 蛋白质双向凝胶电泳聚焦后胶条的白色霜状析出
第六节 蛋白质双向凝胶电泳弥散的蛋白质点
第七节 Clean up失效后的思考
第二章 Western blotting方法
第一节 Wcstcrn—blotting变成了Western—lost
第二节 高背景被“擦”掉了
第三节 “祸起萧墙”——豁然开朗
第四节 蛋白条带不给力
第五节 蛋白抗体不给力
第六节 蛋白抑制剂不给力
第七节 令人费神的磷酸化蛋白的WB检测
第八节 如何使样品间内参趋于一致
第九节 为了那比金子更贵的抗体
第十节 Western Blotting 多个环节需注意
第三章 蛋白质免疫鉴定技术
第一节 都是封闭血清惹的祸
第二节 免疫荧光实验技术之我见
第三节 免疫共沉淀实验的独门秘籍——精选“手术刀”去除免疫球蛋白条带
第四章 蛋白质纯化和蛋白质晶体技术
第一节 试剂说明书不是“金标准”
第二节 沉淀、沉淀，不要再见
第三节 拨开乌云见天日——从蛋白质微晶到晶体
第三篇 细胞技术
第一章 细胞培养的基本技术
第一节特别的爱给特别的你
第二节谁动了我的细胞
第三节如何成功进行大鼠肺动脉平滑肌细胞的体外培养
第二章细胞污染
第一节什么污染
第二节恼人的小黑点
第三节谁是细胞污染的元凶
第四节黑胶虫，请别来找我
第三章细胞活力检测
第一节“鱼”和“熊掌”不可兼得
第二节走自己的路，莫轻易盲从
第三节MTT结晶溶解很重要
第四节不断探索，寻找最佳实验条件
第四章细胞凋亡检测
第一节DAPI染核中细胞固定的重要性
第二节避免非特异染色
第三节胰酶消化制备单细胞悬液
第五章流式细胞术
第一节是谁悄悄蒙上了你的眼睛
第二节动态观察，多思多得
第三节都是染料惹的祸
第六章相关技术
第一节“厚此”≠“薄彼”
第二节向左转？向右转？
第三节染色体制备心得
第四节为什么单个核细胞分离得率不高
第五节如何采用CPT管成功地分离外周血单个核细胞
第四篇微生物与免疫技术
第一章微生物技术
第一节众里寻他千百度——厌氧菌的培养经历
第二节脂多糖银染的技巧
第三节关于重复实验的几点看法
第四节搅拌转速对发酵生产的影响
第五节都是更换生产品种惹的祸
第六节发酵罐染菌的原因分析
第七节快速准确知晓靛基质试验结果的巧方法
第八节变形杆菌属与其他菌属的分离方法
第二章免疫技术
第一节成功中的失败
第二节阳性对照也很重要
第三节酶标板今天“唱白脸”
第四节不要被OD值的大小所迷惑——关于ELISA法检测梅毒假阳性与假阴性的报道
第五节“即刻法”的前两点
第六节加样仪惹的祸
第七节“鱼”与“熊掌”兼得的梅毒检测方法
第八节人兔和谐，共用抗体
第九节我的兔子谁做主
第十节当空白对照不再空白
第十一节自噬体的检测方法
第五篇 动物技术
第一章纲举目张——建模心得
第一节实验动物模型选择
第二节发育损伤模型屡遭失败后的原因探讨
第三节兔VX2肿瘤模型构建方法改进
第四节等长收缩时的力量与持续时间问题
第五节可控水囊的妙用
第六节急性胰腺炎造模方式的选择
第七节颌关节定量加力模型的建立始末
第八节大鼠脑立体放射治疗模型制作
第九节大鼠放射性肺炎模型的制作
第十节小鼠肿瘤放疗模型的制作
第十一节放射性食管损伤模型制作
第十二节痉挛模型中“撞”来的成功
第十三节移植排斥需谨慎
第二章未雨绸缪——实验准备
第一节动物实验前的准备
第二节纪念降脂实验中牺牲的大鼠兄弟们
第三节溶血与凝聚实验中血的代价
第四节吸入染毒装置的改良
第五节与猫配合的降压实验
第六节如何进行裸鼠移植瘤的无菌照射
第三章画龙点睛——实验技巧
第一节柳暗花明又一村——中药体内实验感悟
第二节可怕的过敏实验
第三节祛痰实验方法的改进
……
第六篇 临床检验技术
第七篇 海外实验室技术