简介
马文丽主编的《分子生物学实验手册(附光盘)》共13章,主要由三部分内容组成。第一部分是分子生物学实验的基本操作,包括了实验室的基本要求、仪器操作与溶液配制、大肠杆菌培养和电泳的基本操作、生物信息学的基本分析方法;第二部分集中介绍了核酸研究的基本实验技术,包括核酸的分离纯化与定量、聚合酶链反应、基因克隆、核酸分子杂交、核酸序列测定;第三部分介绍了蛋白质研究的相关实验技术,包括蛋白质的提取、纯化、定量、测定。此外,还在附录中提供了常用溶液的配制和分子生物学实验中常用的资料和参数。
目录
第一部分 基本操作
第1章 分子生物学实验室的基本要求
第一节 实验室规则
第二节 实验室安全
第三节 实验室物品与仪器的管理
第2章 仪器操作、实验用水与溶液配制
第一节 实验仪器操作
第二节 实验用水
第三节 溶液的配制
第3章 大肠杆菌培养的基本操作
第一节 培养前准备
第二节 大肠杆菌培养及测定方法
第三节 大肠杆菌菌株保存
第4章 电泳基本操作
第一节 基本原理
第二节 琼脂糖凝胶电泳
第三节 聚丙烯酰胺凝胶电泳
第四节 双向琼脂糖凝胶电泳
第5章 生物信息学基本分析方法
第一节 核酸信息分析
第二节 蛋白质信息分析
第二部分 核酸实验
第6章 核酸的分离纯化和定量
第一节 质粒DNA的提取与纯化
第二节 基因组DNA的提取
第三节 RNA的提取
第四节 核酸的定量
第7章 聚合酶链反应技术
第一节 PCR实验流程
第二节 普通PCR
第三节 RT-PCR反应
第四节 荧光定量PCR
第8章 基因克隆
第一节 载体的选择
第二节 载体与目的基因的酶切和产物回收
第三节 连接反应
第四节 基因的转移
第五节 阳性重组子的鉴定
第9章 核酸分子杂交
第一节 核酸探针的制备
第二节 斑点杂交
第三节 Southern杂交
第四节 Northern印迹杂交
第五节 基因芯片技术
第10章 核酸序列测定
第一节 双脱氧测序法
第二节 焦磷酸测序法
第三部分 蛋白质实验
第11章 蛋白质的提取与纯化
第一节 蛋白质提取的基本原则
第二节 蛋白质的提取
第三节 基因工程表达蛋白的纯化
第12章 蛋白质的定量检测
第一节 Lowry法测定蛋白质含量
第二节 BCA法测定蛋白质含量
第三节 Bradford法测定蛋白质含量
第13章 目标蛋白质的测定
第一节 蛋白质SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳
第二节 蛋白质免疫印迹法
附录
附录A 溶液配制
附录B 常用核酸和蛋白质相对分子质量标准物
附录C 常用限制性内切核酸酶数据
附录D 核酸蛋白质数据转换
参考文献
第1章 分子生物学实验室的基本要求
第一节 实验室规则
第二节 实验室安全
第三节 实验室物品与仪器的管理
第2章 仪器操作、实验用水与溶液配制
第一节 实验仪器操作
第二节 实验用水
第三节 溶液的配制
第3章 大肠杆菌培养的基本操作
第一节 培养前准备
第二节 大肠杆菌培养及测定方法
第三节 大肠杆菌菌株保存
第4章 电泳基本操作
第一节 基本原理
第二节 琼脂糖凝胶电泳
第三节 聚丙烯酰胺凝胶电泳
第四节 双向琼脂糖凝胶电泳
第5章 生物信息学基本分析方法
第一节 核酸信息分析
第二节 蛋白质信息分析
第二部分 核酸实验
第6章 核酸的分离纯化和定量
第一节 质粒DNA的提取与纯化
第二节 基因组DNA的提取
第三节 RNA的提取
第四节 核酸的定量
第7章 聚合酶链反应技术
第一节 PCR实验流程
第二节 普通PCR
第三节 RT-PCR反应
第四节 荧光定量PCR
第8章 基因克隆
第一节 载体的选择
第二节 载体与目的基因的酶切和产物回收
第三节 连接反应
第四节 基因的转移
第五节 阳性重组子的鉴定
第9章 核酸分子杂交
第一节 核酸探针的制备
第二节 斑点杂交
第三节 Southern杂交
第四节 Northern印迹杂交
第五节 基因芯片技术
第10章 核酸序列测定
第一节 双脱氧测序法
第二节 焦磷酸测序法
第三部分 蛋白质实验
第11章 蛋白质的提取与纯化
第一节 蛋白质提取的基本原则
第二节 蛋白质的提取
第三节 基因工程表达蛋白的纯化
第12章 蛋白质的定量检测
第一节 Lowry法测定蛋白质含量
第二节 BCA法测定蛋白质含量
第三节 Bradford法测定蛋白质含量
第13章 目标蛋白质的测定
第一节 蛋白质SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳
第二节 蛋白质免疫印迹法
附录
附录A 溶液配制
附录B 常用核酸和蛋白质相对分子质量标准物
附录C 常用限制性内切核酸酶数据
附录D 核酸蛋白质数据转换
参考文献
Molecular biology laboratory handbook
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