质谱分析实验指南

本书的目的是使质谱技术能够灵活应用于生命科学，明确质谱技术能够做什么？为此，作者主要从技术和方法层面入手，图文并茂，显浅易明，通俗易懂。从仪器选择，样品制备，技术路线，到分析方法要点，进行了详细的介绍。首先，一是采用质谱分析技术"发现"未知因子，包括配体结合蛋白的发现，翻译后修饰蛋白的检出和鉴定，产生变化蛋白的发现，疾病生物标志物的发现；采用CE/MS技术发现抑郁症血液生物标志物为实例。微生物菌种的快速鉴定等。二是采用质谱分析技术"定量"已知因子，包括检测氨基酸 通过血浆游离氨基酸轮廓早期发现癌症的方法，检测酸性磷脂，检测小RNA，检测气体分子；以硫醇为探针检测H2S及其定量，检测细胞的能量代谢；低氧环境下代谢物的定量，检测细胞的氧化应急；以亲电子化合物8-nitro-cGMP定量为实例，检测蛋白质的"结构变化"等。三是采用质谱成像技术对组织/细胞"可视化"，包括细胞的"能量代谢"成像，在慢性炎症组织中的磷脂分子成像，"药物动态"成像，细胞 亚细胞结构的代谢伴随着细胞动态的观察等。通过基础篇和实践篇的对应关系，完成从基础理论到实际应用的过程，也完成了对MS这个复杂高端仪器的广泛普及应用过程。

前言 杉浦悠毅
本书的构成 5
基本篇 —原理和基础知识—
1 生命科学研究中质谱分析应用方法 杉浦悠毅 2
2 掌握MS实验的具体框架 杉浦悠毅 10
3 “发现”质谱分析 定性MS的基础和原理 杉浦悠毅，新间秀一 18
4 “测定”质谱分析 定量MS的基础和原理 杉浦悠毅，新间秀一 29
5 “成像”质谱分析 质谱成像的基础和原理 杉浦悠毅，新间秀一 37
实践篇 —以实验方法为中心—

第Ⅰ章 用质谱分析“发现”未知因子
1 发现配体结合蛋白质 加部泰明，末松 诚，半田 宏 48
2 翻译后修饰的检测与鉴定 以微管蛋白翻译后修饰新发现为例
池上浩司，新间秀 一，濑藤光利 59
3 探知表达变化的蛋白质 以新蛋白质组学的*定量为例
松本雅记，中山敬一 71
4 发现疾病生物标志物 以CE/MS发现重症抑郁障碍血液生物标志物为例
藤森玉辉，大桥由明，川村则行 81
5 迅速鉴定微生物种类 松山由美子，工藤寿治，川口寿太郎，韮泽 崇 89
第Ⅱ章 用质谱分析“测定”已知因子
6 测定氨基酸 依据PFAA表达谱的癌症早期发现方法 今泉 明，吉田宽郎 98
7 测定酸性溶血磷脂 中西广树 106
8 测定miRNA 坂口裕理子，铃木 勉 112
9 测定气体分子 使用硫醇探针对H2S进行定量 菱木贵子 120
10 测定细胞能量代谢 缺氧环境下代谢通量的定量 南嶋洋司 132
11 测定细胞氧化应激 以亲电子化合物8-nitro-cGMP的定量为例
泽 智裕，居原 秀，赤池孝章 139
12 测定蛋白质的“结构变化” 山本龙也 147
第Ⅲ章 用质谱分析“成像”
13 细胞“能量代谢”成像 杉浦悠毅，梶村真弓 157
14 慢性炎症组织中溶血磷脂成像 杉浦悠毅，花田 充，本多久乐乐 170
15 “药物代谢动力学”成像 新间秀一，滨田哲畅 180

主导方案 选择*重要的实验步骤进行说明
·用Nano LC/ESI-MS系统进行MS测定、数据库检索的详细步骤 解说：山本龙也
·用双向电泳进行蛋白质分离、凝胶内消化的详细步骤 解说：新间秀一
· 采用三重四级杆LC/MS/MS系统MRM法分子定量的详细步骤 解说：中西 豪
·质谱成像中组织切片样品制备、MS测定的详细步骤 解说：杉浦悠毅

第IV章 质谱分析研究策略
16 向着代谢系统生物学的新理解迈进
末松 诚，大村光代，森川隆之，笠原正贵，久保亚紀子，南嶋洋司，梶村真弓 191
结束寄语——写给即将踏上质谱分析之旅的各位朋友 末松 诚 203
附录
1．为初学者准备的质谱分析专业用语集 206
2．适合各实验目的的质谱仪种类简介 208
索引 212

专栏 —前沿应用介绍— 杉浦悠毅
·领域改变，质量也会发生变化 46
·不同领域装置的融合 用质谱流式细胞仪进行多重抗体标记和细胞分析 97
·金属元素分布的质谱成像 189