生物化学实验

第一章生物化学实验的基本要求１
第一节实验的准确性１
一、系统误差１
二、偶然误差２
三、操作错误２
第二节实验记录及报告２
一、实验记录２
二、实验报告３
第三节实验样品的制备４
一、动物的脏器４
二、微生物４
三、细胞４
第二章常见的实验方法及基本原理６
第一节透析６
第二节沉淀７
一、蛋白质的特性７
二、常见的蛋白质沉淀方法７
（一）盐析沉淀７
（二）等电点沉淀９
（三）有机溶剂沉淀９
.（四）热沉淀９
（五）其他沉淀１０
第三节层析１０
一、层析原理１０
二、几种常见的层析法１１
(一)吸附层析１１
(二)分配层析１２
(三)薄层层析１３
(四)凝胶层析１４
(五)离子交换层析１５
(六)高效液相色谱１６
第四节电泳１９
一、电泳法的基本原理１９
二、几种常见电泳法２１
（一）纸电泳２１
（二）醋酸纤维膜电泳２１
（三）琼脂糖电泳２１
（四）聚丙烯酰胺凝胶电泳２２
第五节分光光度法２４
一、基本原理２４
二、比色法２４
三、分光光度法２６
四、浊度法２６
第六节离心２６
第三章普通实验２９
实验一实验的基本操作及要求２９
实验二糖的颜色反应３２
实验三3,5捕硝基水杨酸（dns）法测定还原糖３４
实验四氨基酸的分离鉴定——纸层析法３７
实验五dns瞔l法测定蛋白质n材┒说陌被酸３９
实验六离子交换柱层析法分离氨基酸４１
实验七有机酸的纸上层析法４３
实验八蛋白质性质（一）——蛋白质及氨基酸的呈色反应４５
实验九蛋白质性质（二）——蛋白质等电点的测定和沉淀反应５１
实验十蛋白质的制备——牛奶中提取酪蛋白５６
实验十一总氮量的测定——微量凯氏（ｍｉｃｒｏ玻耄辏澹欤洌幔瑁欤┒ǖ法５８
实验十二folin卜臃ú舛ㄑ清白蛋白含量６２
实验十三bradford法测定蛋白质的含量６３
实验十四紫外分光光度法测定蛋白质的含量６５
实验十五血清蛋白的醋酸纤维薄膜电泳６６
实验十六菜花（花椰菜）中核酸的分离与鉴定６９
实验十七酶的特性７１
实验十八多酚氧化酶的制备和化学性质７５
实验十九影响多酚氧化酶作用的各种因素７８
实验二十碱性蛋白酶活力的测定（福林卜邮约练ǎ７９
实验二十一根据底物浓度和酶反应速度之间的关系求米氏常数km８２
实验二十二酵母rna的提取及定性和定量鉴定８５
实验二十三dna的琼脂糖凝胶电泳８８
实验二十四质粒dna的小量制备９０
实验二十五氨基转换反应——血清谷丙转氨酶（sgpt）活力的测定
（ｋｉｎｇ氏法）９２
实验二十六肌糖原的酵解作用９４
第四章综合实验９８
实验一sds簿郾烯酰胺凝胶电泳及蛋白印迹９８
实验二质粒dna的酶切及连接技术１０３
实验三重组dna质粒的转化技术１０５
实验四枯草杆菌碱性磷酸酶的制备及酶活力的测定１０７
实验五鸡卵类黏蛋白的制备及活力的测定１１１
实验六pcr基因扩增１１５
附录１１８
一、常用仪器的使用１１８
（一）称量仪器１１８
（二）分光光度计１１９
（三）离心机１２１
（四）干燥箱和恒温箱１２２
（五）电热恒温水浴１２２
二、缓冲溶液１２３
（一）缓冲理论１２３
（二）常用缓冲液的配制１２３
（三）ph标定缓冲液的配制１２６
三、常用的硫酸铵饱和度计算表１２６
四、层析法常用数据及性质表１２７
（一）离子交换层析数据及参数１２７
（二）聚丙烯酰胺凝胶的技术数据１２９
（三）琼脂糖凝胶的技术参数１３０
（四）凝胶过滤层析介质的技术参数１３０
五、分子生物学及基因工程常用数据１３２
（一）有关核酸的常用数据１３２
（二）常见限制性内切酶的酶切位点１３３
（三）酶类１３５
（四）缓冲液１３６
（五）与dna凝胶电泳有关的数据１３８
六、一些常用单位１３９
（一）长度单位１３９
（二）体积单位１３９
（三）质量单位１３９
（四）摩尔与摩尔浓度表示法１４０
（五）十进位数量词头及符号１４０
七、元素的原子量表１４０
主要参考书目１４２