简介
生物化学实验课程为清华大学精品课程,《生物化学实验指导》(第2
版)是清华大学生命科学学院生物化学教研室多年实验教学经验的结晶。本
教材分为理论和实验两大部分。理论部分论述了生物大分子制备、层析技
术、电泳技术、离心技术、分光光度技术、免疫化学技术等内容,补充了
新的蛋白质技术;实验部分,除经典的生物化学实验外,增加了生物化学
综合大实验的内容,并更新了生物软件在生物化学实验中的应用部分内容
。生物化学实验的英文参考资料及优秀学生实验报告举例见所附光盘。
修订再版后的教材,删除了陈旧、过时的内容,补充了一些新内容,
理论部分和实验部分结合更紧密,更加注重培养学生的动手能力、独立思
考问题的能力,有利于学生科研能力的提高。
本教材内容新颖、科学,实用性强,可供全国高等院校生物化学及相
关学科专业学生和科研人员参考。
目录
理论部分
1 生物大分子的制备
1.1 概述
1.2 生物大分子制备的前处理
1.2.1 生物材料的选择
1.2.2 细胞的破碎
1.2.3 生物大分子的提取
1.3 生物大分子的分离纯化
1.3.1 沉淀法
1.3.2 透析
1.3.3 超滤
1.3.4 冰冻干燥
1.3.5 样品的保存
1.3.6 分离纯化方法的选择
2 层析技术
2.1 层析技术概述
2.1.1 引言
2.1.2 层析的基本理论
2.1.3 层析的基本概念
2.1.4 层析法的分类
2.1.5 柱层析的基本装置及基本操作
2.2 凝胶层析
2.2.1 简介
2.2.2 凝胶层析的基本原理
2.2.3 凝胶层析的基本概念
2.2.4 凝胶的种类和性质
2.2.5 凝胶的选择、处理和保存
2.2.6 凝胶层析的基本操作
2.2.7 凝胶层析的应用
2.3 离子交换层析
2.3.1 简介
2.3.2 基本原理
2.3.3 离子交换剂的种类和性质
2.3.4 离子交换剂的选择、处理和保存
2.3.5 离子交换层析的基本操作
2.3.6 阴离子交换树脂Q-Sepharose
2.3.7 离子交换层析的应用
2.4 亲和层析
2.4.1 简介
2.4.2 亲和层析的基本原理
2.4.3 亲和吸附剂
2.4.4 亲和层析的基本操作
2.4.5 亲和层析的应用
2.5 高效液相层析(HPLC)
2.5.1 简介
2.5.2 HPLC的特点
2.5.3 HPLC的分类
3 电泳技术
3.1 发展简史
3.2 电泳基本原理
3.3 影响电泳分离的主要因素
3.4 电泳的分类
3.5 纸电泳和醋酸纤维薄膜电泳
3.6 琼脂糖凝胶电泳
3.7 聚丙烯酰胺凝胶电泳
3.8 SDS-PAGE
3.9 梯度凝胶电泳
3.10 等电聚焦电泳
3.11 二维聚丙烯酰胺凝胶电泳
3.12 蛋白质的检测、鉴定及回收
3.13 蛋白质印迹
3.14 毛细管电泳
3.15 芯片毛细管电泳
……
4 离心技术
5 分光光度技术
6 免疫化学技术
7 其他新技术概览
实验部分
实验1 蛋白质含量测定法
实验2 凝胶层析法测定蛋白质分子质量
实验3 等电聚焦电泳法测定蛋白质的等电点
实验4 蛋白质的聚丙烯酰胺凝胶电泳
实验5 小牛胸腺DNA的制备
实验6 小牛胸腺DNA熔解温度的测量
实验7 脱辅基血红蛋白的制备和重组
实验8 离子交换柱层析分离核苷酸
实验9 猪胰蛋白酶的纯化及其活性测定
实验10 亲和层析纯化胰蛋白酶
实验11 兔肌肌酸激酶的分离纯化及部分性质测定
实验12 免疫化学实验
实验13 生物软件在生物化学实验中的应用
实验14 热休克蛋白16.3的分离纯化和活性测定
附录
参考文献
1 生物大分子的制备
1.1 概述
1.2 生物大分子制备的前处理
1.2.1 生物材料的选择
1.2.2 细胞的破碎
1.2.3 生物大分子的提取
1.3 生物大分子的分离纯化
1.3.1 沉淀法
1.3.2 透析
1.3.3 超滤
1.3.4 冰冻干燥
1.3.5 样品的保存
1.3.6 分离纯化方法的选择
2 层析技术
2.1 层析技术概述
2.1.1 引言
2.1.2 层析的基本理论
2.1.3 层析的基本概念
2.1.4 层析法的分类
2.1.5 柱层析的基本装置及基本操作
2.2 凝胶层析
2.2.1 简介
2.2.2 凝胶层析的基本原理
2.2.3 凝胶层析的基本概念
2.2.4 凝胶的种类和性质
2.2.5 凝胶的选择、处理和保存
2.2.6 凝胶层析的基本操作
2.2.7 凝胶层析的应用
2.3 离子交换层析
2.3.1 简介
2.3.2 基本原理
2.3.3 离子交换剂的种类和性质
2.3.4 离子交换剂的选择、处理和保存
2.3.5 离子交换层析的基本操作
2.3.6 阴离子交换树脂Q-Sepharose
2.3.7 离子交换层析的应用
2.4 亲和层析
2.4.1 简介
2.4.2 亲和层析的基本原理
2.4.3 亲和吸附剂
2.4.4 亲和层析的基本操作
2.4.5 亲和层析的应用
2.5 高效液相层析(HPLC)
2.5.1 简介
2.5.2 HPLC的特点
2.5.3 HPLC的分类
3 电泳技术
3.1 发展简史
3.2 电泳基本原理
3.3 影响电泳分离的主要因素
3.4 电泳的分类
3.5 纸电泳和醋酸纤维薄膜电泳
3.6 琼脂糖凝胶电泳
3.7 聚丙烯酰胺凝胶电泳
3.8 SDS-PAGE
3.9 梯度凝胶电泳
3.10 等电聚焦电泳
3.11 二维聚丙烯酰胺凝胶电泳
3.12 蛋白质的检测、鉴定及回收
3.13 蛋白质印迹
3.14 毛细管电泳
3.15 芯片毛细管电泳
……
4 离心技术
5 分光光度技术
6 免疫化学技术
7 其他新技术概览
实验部分
实验1 蛋白质含量测定法
实验2 凝胶层析法测定蛋白质分子质量
实验3 等电聚焦电泳法测定蛋白质的等电点
实验4 蛋白质的聚丙烯酰胺凝胶电泳
实验5 小牛胸腺DNA的制备
实验6 小牛胸腺DNA熔解温度的测量
实验7 脱辅基血红蛋白的制备和重组
实验8 离子交换柱层析分离核苷酸
实验9 猪胰蛋白酶的纯化及其活性测定
实验10 亲和层析纯化胰蛋白酶
实验11 兔肌肌酸激酶的分离纯化及部分性质测定
实验12 免疫化学实验
实验13 生物软件在生物化学实验中的应用
实验14 热休克蛋白16.3的分离纯化和活性测定
附录
参考文献
生物化学实验指导
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